IgG2c檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫測定法（ELISA），用于小鼠血漿和血清樣本中IgG2c的定量測定。僅供研究使用。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品小鼠IgG2c ELISA試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

小鼠IgG2c ELISA試劑盒檢測原理：

雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）的原理如圖1所示。在這個(gè)檢測中，樣本中存在的IgG2c與已經(jīng)吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗IgG2c抗體發(fā)生反應(yīng)。洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）結(jié)合的抗IgG2c抗體。這些酶標(biāo)記的抗體與之前結(jié)合的IgG2c形成復(fù)合物。經(jīng)過另一次洗滌步驟，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來檢測與免疫吸附劑結(jié)合的酶。結(jié)合酶的量與被測試樣本中IgG2c的濃度成正比；因此，450納米處的吸光度是測試樣本中IgG2c濃度的量度。測試樣本中的IgG2c量可以通過從標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行插值，并根據(jù)樣本稀釋進(jìn)行校正。

未提供但必需的材料

精密移液管（2 ?L至1000 ?L）用于制作和分發(fā)稀釋液

試管

噴霧瓶或微孔板洗滌/抽吸器

蒸餾水或去離子水

微孔板讀數(shù)器

用于準(zhǔn)備試劑和緩沖溶液的各種玻璃器皿

計(jì)時(shí)器

抗凝劑（用于血漿樣本收集）

離心機(jī)

樣本收集和處理

所有血液成分和生物材料應(yīng)視為潛在危險(xiǎn)物品。在處理和處置時(shí)遵循通用預(yù)防措施。

如果血液樣本出現(xiàn)凝血、嚴(yán)重溶血、脂血，或樣本的完整性受到關(guān)注，應(yīng)做記錄并謹(jǐn)慎解釋結(jié)果。

下面列出的樣本收集和儲存條件是作為一般指導(dǎo)方針。樣本的穩(wěn)定性尚未評估。

血清樣本：應(yīng)通過靜脈穿刺收集血液。血液凝固后通過離心分離血清。移除血清并立即進(jìn)行檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

血漿樣本：應(yīng)將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進(jìn)行離心。立即進(jìn)行檢測或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

已知干擾物質(zhì)：疊氮化物和硫柳汞在高于0.1%的濃度下會(huì)抑制酶反應(yīng)。

樣本稀釋

檢測要求在使用前對每個(gè)測試樣本進(jìn)行稀釋。每次進(jìn)行檢測時(shí)，所有樣本都應(yīng)以雙份進(jìn)行檢測。推薦的稀釋比例僅供參考。稀釋比例應(yīng)基于未知樣本的預(yù)期濃度，以便稀釋后的樣本落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)。如果不確定樣本值，在運(yùn)行整個(gè)板之前，強(qiáng)烈建議對一個(gè)或兩個(gè)代表性樣本進(jìn)行連續(xù)稀釋。

血清和血漿樣本 - 推薦的起始稀釋比例為1:5,000。要準(zhǔn)備1:5,000的樣本稀釋液，將5 ?L的樣本轉(zhuǎn)移到495 ?L的1X稀釋液中。這會(huì)產(chǎn)生1:100的稀釋液。接下來，將1:100的稀釋液通過轉(zhuǎn)移10 ?L到490 ?L的1X稀釋液中進(jìn)行稀釋。這會(huì)產(chǎn)生1:5,000的稀釋液。每個(gè)階段都要徹底混合。

試劑準(zhǔn)備

使用前將所有試劑置于室溫（16°C至25°C）。

稀釋液濃縮液 - 提供的稀釋液是5倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水按1:5稀釋（1份緩沖液濃縮液，4份dH2O）。

洗滌液濃縮液 - 提供的洗滌液是20倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水按1:20稀釋（1份緩沖液濃縮液，19份dH2O）。當(dāng)儲存溫度較低時(shí)，濃縮液中可能會(huì)形成結(jié)晶。在稀釋前將濃縮液加熱至30-35°C可以溶解結(jié)晶。

酶-抗體結(jié)合物 - 通過向每個(gè)微孔板測試條添加10 ?L酶-抗體結(jié)合物至990 ?L的1X稀釋液中，計(jì)算每個(gè)微孔板測試條所需的工作結(jié)合物溶液量。使用前立即稀釋，并避光。均勻混合，但要輕柔。避免起泡。

預(yù)涂層ELISA微孔板 - 按提供的狀態(tài)即開即用。揭開箔袋，從袋中取出板。移除在測定中不會(huì)使用的條和孔，放回袋中并重新密封，連同干燥劑。

小鼠IgG2c校準(zhǔn)物 - 根據(jù)批次特定的分析證書準(zhǔn)備。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

作為ALPCO在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的ALPCO產(chǎn)品。