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QA-Bio-O-糖苷酶純度測試方案

發(fā)布者:艾美捷科技    發(fā)布時間:2024-08-01     
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僅切割未被取代的Gal-β(1-3)GalNAcα二糖,這些二糖連接在糖蛋白或糖肽的絲氨酸或蘇氨酸殘基上。必須先用適當(dāng)?shù)耐馇刑擒彰溉コ僖核帷肴樘恰r藻糖或N-乙酰氨基葡萄糖等取代基,然后才能用O-糖苷酶處理。至少,通常需要使用神經(jīng)氨酸酶,例如編號E-S001的神經(jīng)氨酸酶Au(Alpha-2-3,6,8,9),來去除唾液酸。

O-糖苷酶

艾美捷QA-Bio-O-糖苷酶

產(chǎn)品編號:E-G001

推薦與E-G001配套使用的試劑包括:

1瓶:5倍反應(yīng)緩沖液,250 mM 磷酸鈉,pH 5.0

活性 ≥ 1.25 U/ml

比活性 ≥ 12 U/mg

比活性定義:O-糖苷酶的一個單位定義為在37°C、pH 5.0條件下,1分鐘內(nèi)產(chǎn)生1微摩爾對硝基苯酚(pNP)所需的酶量,該反應(yīng)來自對硝基苯基2-乙酰氨基-2-脫氧-3-O-(β-D-半乳糖吡喃糖基)-α-D-半乳糖吡喃苷。

儲存:在4°C下儲存酶,不要冷凍。

配方:酶作為無菌過濾溶液提供,在50 mM 磷酸鈉(pH 7.5)中。

分子量:約180,000道爾頓

pH 最佳值:5,活性范圍5-7。

 

純度:

O-糖苷酶的污染蛋白酶測試如下:將10?g變性BSA與2?l酶在37°C下孵育24小時。經(jīng)處理的BSA的SDS-PAGE分析顯示沒有降解的跡象。生產(chǎn)宿主菌株已經(jīng)過廣泛測試,不產(chǎn)生任何可檢測的糖苷酶。

 

文獻參考:

Bhavanandan, V.P. , J. Umemoto and E.A.Davidson. Characterization of an endo-alpha-Nacetylgalactosaminidase from Diplococcus pneumoniae.Biochem Biophys 70:738-745 (1976).

Fan, J. Q., K. Yamamoto, H. Kumagai and T. Tochikura.Induction and efficient purification of endo-alpha-Nacetyl-D-galactosaminidase from Alcaligenes sp. AgricBiol Chem 54:233-234 (1990).

Glasgow, L R., J. C. Paulson and R. L. Hill. Systematicpurification of five glycosidases from Streptococcuspneumoniae. J Biol Chem 252:8615-8623 (1977).

Iwase, H. and K. Hotta. Release of O-linked glycoproteinglycans by endo-alpha-N-acetyl-D-galactosaminidase.Methods Mol Biol 14:151-159 (1993).

Unemoto, J., V. P. Bhavanandan and E. A. Davidson.Purification and properties of an endo-alpha-N-acetylD-galactosaminidase from Diplococcus pneumoniae. JBiol Chem 252:8609-8614 (1977).

 

本產(chǎn)品僅用于體外研究。


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