Tyrosyl-DNA磷酸二酯酶-2（TDP2）的功能是通過在DNA斷裂部位加工5′-阻斷蛋白（topo II）來去除被捕獲的拓撲異構酶II/DNA復合物（圖1）。就生理相關性而言，TDP2似乎具有多種作用，遠遠超出了II型拓撲異構酶損傷的修復和隨后的DNA修復。這與Top1/DNA修復蛋白TDP1有很大不同。TDP1和2之間也存在許多機制差異（見Pommier的評論，PMID 24856239）。在人類中，TDP2應被視為一種多功能酶，在TNF和MAPK/JNK/p38通路中發(fā)揮作用。與APE1和Mg++/Mn++依賴性磷酸二酯酶超家族有一些相似之處，有證據(jù)表明，皮核糖核酸病毒將TDP2作為VPg非連接酶功能。鑒于拓撲異構酶II在抗癌治療中的關鍵作用，抑制TDP2的藥物可能被證明可用于與阿霉素和依托泊苷（VP16）等已建立的界面毒物（IFP）的聯(lián)合治療。由于這種想法，已經(jīng)有了一些TDP2候選抑制劑。TDP2特異性識別5'-磷酸酪氨酸鍵，合成底物可用于HTS和藥物發(fā)現(xiàn)（例如，4-硝基苯基膦酸乙酯或放射性標記的寡核苷酸）。雖然這些合成或半合成底物可用于高通量篩選，但抑制劑需要在真正的Top2/DNA共價加合物上進行測試和驗證。因此，TopoGEN開發(fā)了一種真正的Top2/DNA底物。

TopoGEN提供捕獲的、未經(jīng)處理的Top2/kDNA共價復合物，可以有效地用作TDP2底物（檢測大綱見圖2）。由于存在共價結合的蛋白質(zhì)，除非添加蛋白酶K（降解并釋放大部分變性Top2a）或TDP2反應釋放被捕獲的蛋白質(zhì)，否則無法檢測到線性CC復合物（圖2，左泳道）。

艾美捷TopoGEN-人TDP-2檢測試劑盒：

編號：TG1005

分類：TPD2

標簽：人類Tdp2測定，Tdp2，酪氨酸DNA磷酸二酯酶2

人類TDP2測定試劑盒包含了在易制備的1%瓊脂糖凝膠中定量TDP2活性所需的試劑。由于kDNA是一個如此大的底物，凝膠可以快速運行（在100-250伏下不到10分鐘），從而提高通量。試劑盒中包含標記物，以便明確解讀結果。通過使用如ImageJ之類的共享軟件掃描凝膠，結果可以輕松量化。

試劑盒可以在常溫下運輸或在冰上（干冰或濕冰）運輸。收到后，DNA應儲存在4°C，緩沖液儲存在-20°C。避免頻繁的凍融循環(huán)，因為這可能導致DNA斷裂。

艾美捷科技是TopoGEN的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務。