由于存在污染的拓撲異構酶I，使用依賴于超螺旋DNA弛豫的Top2（人類和細菌）粗提取物的檢測可能會變得復雜。污染的核酸酶活性（由于Mg++）會降解或劃傷超螺旋底物，從而產生其他復雜情況。這些問題可以通過使用由昆蟲Crithidia fasiculata錐蟲動質體制備的鏈狀kDNA底物來避免。KDNA是互鎖的DNA微環(huán)（大多為2.5kb）的集合，形成了高分子量的超大網(wǎng)絡。因此，這些網(wǎng)絡無法進入瓊脂糖凝膠。與Top2（Top2a、Gyrase或TopIV）一起孵育后，微環(huán)DNA被有效釋放（并脫輔），Top2使DNA參與雙鏈斷裂和重組循環(huán)。由于尺寸小，脫鏈的微環(huán)迅速進入凝膠。拓撲異構酶I不會發(fā)生這種反應。TopoGEN修改了原始凝膠系統(tǒng)，允許使用kDNA對活性進行額外區(qū)分。反應產物可以如圖所示變化。我們提供標記kDNA，如圖所示，以清楚地鑒定反應產物，在這種情況下是脫鏈的kDNA形式。

艾美捷TopoGEN-脫乙酰kDNA：

編號：TG2020-1

分類：DNA底物

標簽：解鏈kDNA、解鏈kDNA標記、kDNA標記、拓撲異構酶2測定

解鏈kDNA質量控制測試：

對于連環(huán)kDNA底物，至少90%的DNA將保留在1%瓊脂糖凝膠的孔中。

每批kDNA的解鏈都經(jīng)過純化的拓撲異構酶II測試。

該標記在常溫下運輸，應儲存在4°C。

脫乙酰kDNA文獻參考：

Miller et al., J. Biol. Chem. 256:9334-9339 (1981)

Muller et al., Biochem. 27:8369-8379, 1988

Muller et al., Nuc. Acid. Res. 17:9499, 1989

艾美捷科技是TopoGEN的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質的產品與服務。