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特色產品Kinetoplast DNA(kDNA)是拓撲異構酶II測定的理想底物,因為它對II型反應機制具有特異性。研究人員甚至可以在存在大量過量拓撲異構酶I的情況下檢測II型酶。因此,kDNA可以很好地量化粗細胞提取物中的II型活性,這些提取物經常被拓撲異酶I超載。kDNA與人類Top 2a和b以及原核酶,如DNA Gyrase或拓撲異異構酶IV,都表現得非常好。這種底物與我們的Topo II檢測試劑盒、Topo II藥物篩選試劑盒和Gyrase檢測試劑盒包裝在一起。

艾美捷TopoGEN-Kinetoplast DNA(kDNA):
編號:TG2013
分類:DNA底物
標簽:DNA旋轉酶、kDNA、kDNA底物、動力蟲DNA、拓撲異構酶2
與其他DNA底物的區別:
基于超螺旋DNA松弛的粗提物中拓撲異構酶II活性的測定可能會因為部分純化分數中存在拓撲異構酶I而變得復雜。由于Mg++的存在,污染的核酸酶活性可能會導致超螺旋底物降解或產生切口,這會引起額外的復雜性。通過使用從昆蟲錐蟲屬克氏錐蟲的動粒中制備的kDNA底物,可以避免這些問題。動粒DNA是由相互鎖定的DNA小圓圈(大部分為2.5 kb)聚集而成的,形成極高分子量的大型網絡。因此,這些網絡無法進入瓊脂糖凝膠。在與人類拓撲異構酶II alpha孵育后,該酶通過雙鏈DNA斷裂和重新連接循環,有效地釋放(解鏈)小圓圈DNA。解鏈后的小圓圈由于尺寸小,會迅速進入凝膠。這種反應是II型酶特有的,不會檢測到拓撲異構酶I。TopoGEN的kDNA經過認證,可與我們所有的Top2酶一起使用,但適用于人類/動物細胞系的粗提物。
對于連環kDNA底物,至少90%的DNA將保留在1%瓊脂糖凝膠的孔中。
kDNA儲存在10 mM Tris-Cl(pH 7.5)和1 mM EDTA中,濃度如產品說明所示。
kDNA應儲存在4°C;然而,長期儲存在-20°C也是可以接受的。底物通常在常溫下運輸。
TopoGEN-Kinetoplast DNA(kDNA)文獻參考:
Ege Gok, Naz Unal, Burcin Gungor, Gulderen Karakus, Savas Kaya, Pakize Canturk and Konstantin P. Katin: Evaluation of the Anticancer and Biological Activities of Istaroxime via Ex Vivo Analyses, Molecular Docking and Conceptual Density Functional Theory Computations. Molecules 2023, 28(22), 7458;
Phillips JW, Goetz MA, Smith SK, Zink DL, Polishook J, Onishi R, Salowe S, Wiltsie J, Allocco J, Sigmund J, Dorso K, Lee S, Skwish S, de la Cruz M, Martin J, Vicente F, Genilloud O, Lu J, Painter RE, Young K, Overbye K, Donald RGK, Singh SB: Discovery of Kibdelomycin, A Potent New Class of Bacterial Type II Topoisomerase Inhibitor by Chemical-Genetic Profiling in Staphylococcus aureus. Cell Chemistry and Biology 2011, 18: 955-965. doi: 10.1016/j.chembiol.2011.06.011.
艾美捷科技是TopoGEN的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。
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