由于部分純化的組分中存在拓撲異構(gòu)酶I，基于超螺旋DNA弛豫的使用粗提取物進行拓撲異肽酶II活性的測定可能會很復雜。污染核酸酶活性（由于Mg++）會降解或劃傷超螺旋底物，從而產(chǎn)生額外的并發(fā)癥。這些問題可以通過使用由昆蟲Crithidia fasiculata錐蟲動質(zhì)體制備的鏈狀DNA底物來避免。KDNA是互鎖的DNA微環(huán)（大多為2.5kb）的集合，形成了高分子量的超大網(wǎng)絡。因此，這些網(wǎng)絡無法進入瓊脂糖凝膠。當與拓撲異構(gòu)酶II一起孵育時，它會使DNA參與雙鏈斷裂和重組循環(huán)，從而有效地釋放（脫鏈）微環(huán)DNA。由于尺寸小，脫鏈的微環(huán)迅速進入凝膠。拓撲異構(gòu)酶I不會發(fā)生這種反應。TopoGEN修改了Miller等人描述的原始凝膠系統(tǒng)，以允許使用kDNA對活性進行額外區(qū)分。

艾美捷TopoGEN-線性kDNA：

編號：TG2018-1

分類：DNA底物

標簽：kDNA標記，線性kDNA，線性kDNA標記

kDNA是II型酶的理想底物，無論是原核生物還是真核生物。它對于斷裂和重新連接DNA雙鏈的拓撲異構(gòu)酶具有高度特異性；這定義了II型（雙鏈DNA）的作用機制。確保kDNA純凈、純化至已知濃度、無核酸酶且驗證可與top2酶一起工作至關重要。

線性kDNA質(zhì)量控制測試：

對于連環(huán)kDNA底物，至少90%的DNA將保留在1%瓊脂糖凝膠的孔中。

每批kDNA的解鏈都經(jīng)過純化的拓撲異構(gòu)酶II測試。

該標記在常溫下運輸，應儲存在4°C。

TopoGEN-線性kDNA文獻參考：

Miller et al., J. Biol. Chem. 256:9334-9339 (1981)

Muller et al., Biochem. 27:8369-8379, 1988

Muller et al., Nuc. Acid. Res. 17:9499, 1989

艾美捷科技是TopoGEN的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務。