今天我給大家來嘮嘮關(guān)于目的基因甲基化檢測(cè)方面（m6A、 5mC和5hmC）的產(chǎn)品搭配，不過我的搭配也只是一種可能的選擇（不過也有文章報(bào)道過我說的方式），所以我今天也只是給大家推薦推薦，看看能不能給小伙伴們的研究帶來一種思路，如果小伙伴覺得可行，可以咨詢小艾進(jìn)行產(chǎn)品問詢，如果您覺得不可行，也歡迎各位小伙伴批評(píng)指正哦~~

具體事情是這樣的，最近收到很多小伙伴的問詢，比如：

“我想要檢測(cè)xxx基因的5mC甲基化水平，請(qǐng)問用您們的Epigentek p-1030試劑盒可以檢測(cè)嗎？”

“我想要檢測(cè)xxx基因的5hmC甲基化水平，用您們的Epigentek的p-1032可以檢測(cè)嗎？”

“請(qǐng)問用p-9005可以檢測(cè)xxx基因的m6A水平嗎？”……

但是呢，上述說的3個(gè)試劑盒p-1030、p-1032和p-9005都是用來檢測(cè)總體水平的5mC、5hmC和m6A的量，不能檢測(cè)單個(gè)基因的。

這么回復(fù)之后，有小伙伴又問：“我是不是可以自己購買特定目標(biāo)基因的抗體用這個(gè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)呢？比如我要檢測(cè)A基因的甲基化，我去購買A基因的抗體，搭配這個(gè)試劑盒檢測(cè)可以嗎？”

RE： 不可以哦，這個(gè)試劑盒里面的抗體是專門針對(duì)這些修飾位點(diǎn)進(jìn)行設(shè)計(jì)的，也是經(jīng)過廠家驗(yàn)證能夠匹配整個(gè)試劑盒使用的，所以如果您用自己的抗體來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，很可能是檢測(cè)不到的呢。如果您能提取單個(gè)基因的DNA或者RNA樣本，倒是可以用這些試劑盒檢測(cè)。不過有點(diǎn)難呢，當(dāng)然客戶可以自行嘗試~~

“那有可以檢測(cè)單個(gè)基因的產(chǎn)品推薦嗎？我不要檢測(cè)總的，就要檢測(cè)單基因的。”

相信有很多小伙伴對(duì)這方面很感興趣。接下來我們就大家說說我“建議”的思路。

1.如何定量檢測(cè)A基因的DNA 5mC甲基化水平？

關(guān)于DNA 5mC甲基化水平的檢測(cè)，如果是檢測(cè)總的，那很好辦，一個(gè)p-1030或者p-1034就可以搞定，簡(jiǎn)單快捷，結(jié)果還好看。但是針對(duì)特定基因的話，就不能用這個(gè)產(chǎn)品了。我這邊的思路主要2個(gè)：

【1】關(guān)于特異基因的甲基化修飾檢測(cè)我想大家有個(gè)先入為主的概念就是MSP或者BSP。BSP是甲基化檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)，不過我今天就不細(xì)說了。主要說說MSP—甲基化特異性PCR。MSP的實(shí)驗(yàn)過程簡(jiǎn)單來說就是提取樣本中的DNA進(jìn)行亞硫酸鹽轉(zhuǎn)換，最后將轉(zhuǎn)換的DNA進(jìn)行定量PCR，由此來確定特異基因甲基化修飾。

產(chǎn)品搭配：

產(chǎn)品轉(zhuǎn)換流程和結(jié)果展示：

【2】IP。IP是個(gè)非常常用的技術(shù)手段，幾乎聽到IP大家都能知道這是干啥的。不過大家也有個(gè)先入為主的概念，就是IP只能下拉蛋白，是不是？IP抗體+磁珠，下拉下來的不就是蛋白嘛！但是，我們的IP試劑盒產(chǎn)品是可以下拉DNA和RNA的。我們現(xiàn)在需要的是含有5mC的DNA對(duì)吧？我們有專門的IP試劑盒下拉所有含有5mC的DNA。

產(chǎn)品搭配方案：

產(chǎn)品富集流程+結(jié)果展示：

2.如何定量檢測(cè)A基因的 5hmC甲基化水平？

關(guān)于DNA羥甲基化的定量檢測(cè)，我們檢測(cè)總的話就是p-1032，基于ELISA的方法，可進(jìn)行絕對(duì)的定量。而特異基因的5hmC檢測(cè)參照的方式與5mC的一樣，也是先IP下來所有的5hmC DNA，再進(jìn)行定量檢測(cè)。

產(chǎn)品搭配：

產(chǎn)品富集流程+結(jié)果展示：

3.如何定量檢測(cè)A基因的 RNA m6A甲基化水平？

檢測(cè)總的RNA m6A的量我們常用的是p-9005，而且這個(gè)產(chǎn)品我們賣的非常火，購買的人也非常的多，同時(shí)參考文獻(xiàn)也很多，我們是有現(xiàn)貨的。所以因?yàn)檫@個(gè)產(chǎn)品好用名氣大，所以很多小伙伴想用這個(gè)試劑盒來檢測(cè)單個(gè)基因的m6A的量。但是，這個(gè)產(chǎn)品也不能檢測(cè)單個(gè)基因的RNA m6A的量。所以，至于如何進(jìn)行單個(gè)基因的，我推薦的思路與前面DNA的5mC和5hmC是一樣的。也是先進(jìn)行IP，再進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)，這里就多了一步反轉(zhuǎn)錄。

產(chǎn)品搭配：

產(chǎn)品富集流程+結(jié)果展示：

當(dāng)然，我們的產(chǎn)品不止我提到的這些，還有其他的產(chǎn)品可供選擇，大家若是感興趣，可以咨詢小艾喲~~~

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