因子 V 是一種大的單鏈血漿糖蛋白,是血液凝固級聯(lián)反應(yīng)的重要組成部分。 在凝血過程中,前因子 V 因子通過絲氨酸蛋白酶 a-凝血酶(如上所示)的有限蛋白水解轉(zhuǎn)化為活性輔因子 Va 因子,Xa 因子的效率較低。 活性輔助因子由 NH2 末端衍生的重鏈(Mr = 94,000)和 COOH 末端衍生的輕鏈(Mr = 74,000)組成,它們在鈣離子存在的情況下保持非共價結(jié)合。 因子Va作為絲氨酸蛋白酶因子 Xa 的輔助因子。Va 因子和 Xa 因子以非共價和鈣離子依賴性方式聚集在磷脂表面,形成凝血酶原復(fù)合物。 凝血酶原復(fù)合物負責(zé)將酶原凝血酶原快速轉(zhuǎn)化為活性絲氨酸蛋白酶α-凝血酶。 凝血酶原復(fù)合物的組裝使凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶的速率比單獨使用因子 Xa 的速率提高近 300,000 倍。 凝血酶原復(fù)合物的下調(diào)部分是通過活化蛋白 C 使因子 Va 失活來實現(xiàn)的。人因子 V 是使用免疫親和層析從新鮮冷凍人血漿中制備的,如 Katzmann及其同事所述。牛因子V是使用 Nesheim 及其同事所述的常規(guī)色譜技術(shù)從新鮮牛血漿中制備的。 純化的因子 V 以 50%(體積/體積)甘油/水的形式提供,應(yīng)儲存在 -20°C 下。 通過 SDS-PAGE 分析確定純度,并在因子 V 凝血測定中測量活性。