MethylFlash羥甲基化DNA定量試劑盒(比色法)中含有定量檢測全基因組羥甲基化所必需的所有試劑.在檢測實驗中,DNA被固定在一種有DNA吸附能力的孔上,羥甲基化的片段會被捕獲劑以及檢測抗體識別,用分光光度計讀取微孔板在450nm處的比色度定量.羥甲基化的DNA的量與OD值成線性關(guān)系,可以通過本試劑盒提供的方程來計算兩種不同的羥甲基化DNA樣品的相對羥甲基化狀態(tài)或者通過標準曲線完全定量5-mc.基于其工作原理和微孔板模式,本試劑盒可以用于各種物種來源的多種樣品形式,包括培養(yǎng)的細胞、新鮮和冷凍的組織、石蠟包埋組織、血漿/血清樣品以及體液樣品.本試劑盒曾經(jīng)對來自小鼠大腦和海拉細胞系的樣品成功地進行了5-hmC的定量,所得到的結(jié)果與用HPLC和LC-MS的方法相當.通過使用本試劑盒,研究者們首次在正常人類腦部組織和結(jié)腸組織中發(fā)現(xiàn)了高豐度的5-hmC.同時,研究結(jié)果還顯示,正常人類腦部組織和結(jié)腸組織中5-hmC分別占總甲基化胞嘧啶(5-mC和5-hmC的總和)的32%和16%.相反,在結(jié)腸癌細胞系(HCT116)和宮頸癌細胞系(HeLa)中,5-hmC的比率很低,幾乎沒有.該羥甲基化DNA定量試劑盒(比色法)內(nèi)主要產(chǎn)品組份包括:HC1 (10X Wash Buffer)
HC2 (Binding Solution)
HC3 (Negative Control I, 20 ug/ml)
HC4 (Negative Control II, 20 ug/ml)
HC5 (Positive Control, 20 ug/ml)
HC6 (Capture Antibody, 1000 ug/ml
HC7 (Detection Antibody, 400 ug/ml)
HC8 (Enhancer Solution)
HC9 (Developer Solution)
HC10 (Stop Solution)
8-Well Assay Strips (With Frame)
用戶指南手冊
* Spin the solution down to the bottom prior to use.
Note: The HC3 Negative Control I is an unmethylated polynucleotide containing 20% of cytosine. The HC4 Negative Control II is a methylated polynucleotide containing 20% of 5-methylcytosine. The HC5 Positive Control is a hydroxymethylated polynucleotide containing 20% of hydroxymethylcytosine.
產(chǎn)品特點
1、整個比色法檢測實驗的操作簡單易學(xué),方便快捷,只需要3小時45分鐘就能完成實驗.96孔板模式讓您可以根據(jù)自己的需要地選擇用手工或者高通量;2、試劑盒中提供通用陽性和陰性對照,能用于定量檢測各種來源的DNA樣品中的羥甲基化狀態(tài),包括哺乳動物、植物、真菌、細菌以及病毒;3、試劑盒中含有定量檢測全基因組DNA羥甲基化實驗所有用到的試劑,包括陽性和陰性對照.直接測定比色度的方法來進行定量檢測取代了已過時的和劣質(zhì)的方法,無須DNA消化/變性、提取,不用使用套色版,不接觸放射性材料;4、本試劑盒用到的新方法和專利試劑使得羥甲基化DNA定量實驗結(jié)果精確、高度靈敏特異,檢測極限為40 pg的羥甲基化DNA,檢測范圍寬至40 pg 到 20 ng,檢測靈敏度是HPLC的十倍(0、008% vs 0、08%),不與DNA上甲基化或者未甲基化胞嘧啶反應(yīng),專一檢測5-hmC.
已發(fā)表的部分文獻: 標題:Association of Global DNA Methylation and Global DNA Hydroxymethylation with Metals and other Exposures in Human Blood DNA Samples.作者:Tellez-Plaza M, Tang WY, Shang Y, Umans JG, Francesconi KA, Goessler W, Ledesma M, Leon M, Laclaustra M, Pollak J, Guallar E, Cole SA, Fallin MD, Navas-Acien A;雜志名稱:Environ Health Perspect 標題:Distribution of 5-hydroxymethylcytosine in different human tissues.作者:Li W, Liu M;雜志名稱:J Nucleic Acids 標題:Effect of aging on 5-hydroxymethylcytosine in the mouse hippocampus.作者:Chen H, Dzitoyeva S, Manev H;雜志名稱:Restor Neurol Neurosci 標題:Effect of aging on 5-hydroxymethylcytosine in brain mitochondria.作者:Dzitoyeva S, Chen H, Manev H;雜志名稱:Neurobiol Aging 標題:Effect of valproic acid on mitochondrial epigenetics.作者:Chen H, Dzitoyeva S, Manev H;雜志名稱:Eur J Pharmacol 標題:Methylome profiling reveals distinct alterations in phenotypic and mutational subgroups of myeloproliferative neoplasms.作者:Nischal S, Bhattacharyya S, Christopeit M, Yu Y, Zhou L, Bhagat TD, Sohal D, Will B, Mo Y, Suzuki M, Pardanani A, McDevitt M, Maciejewski JP, Melnick AM, Greally JM, Steidl U, Moliterno A, Verma A;雜志名稱:Cancer Res 標題:Identification of epigenetically altered genes in sporadic amyotrophic lateral sclerosis.作者:Figueroa-Romero C, Hur J, Bender DE, Delaney CE, Cataldo MD, Smith AL, Yung R, Ruden DM, Callaghan BC, Feldman EL;雜志名稱:PLoS One 標題:Use of atorvastatin in systemic lupus erythematosus in children and adolescents.作者:Schanberg LE, Sandborg C, Barnhart HX, Ardoin SP, Yow E, Evans GW, Mieszkalski KL, Ilowite NT, Eberhard A, Imundo LF, Kimura Y, von Scheven E, Silverman E, Bowyer SL, Punaro M, Singer NG, Sherry DD, McCurdy D, Klein-Gitelman M, Wallace C, Silver R, Wagner-Weiner L, Higgins GC, Brunner HI, Jung L, Soep JB, Reed AM, Provenzale J, Tho;雜志名稱:Arthritis Rheum Epigentek 公司是全球領(lǐng)先的表觀遺傳學(xué)相關(guān)研究的技術(shù)創(chuàng)新者和產(chǎn)品開發(fā)供應(yīng)商。開發(fā)了超過700多個專利產(chǎn)品,為表觀遺傳學(xué)方面的研究和新藥研發(fā)提供全面系統(tǒng)的解決方案,涵蓋樣品制備、DNA/RNA甲基化(5-mc, 5-hmc, 5-fc, m6A)/DNMT分析、ChIP、組蛋白甲基化/乙酰化/去乙酰化/磷酸化/SUMO-等領(lǐng)域,提供小分子抑制劑、蛋白質(zhì)、抗體、以及分析試劑盒產(chǎn)品。