MethylFlash羥甲基化DNA定量試劑盒(比色法)中含有定量檢測(cè)全基因組羥甲基化所必需的所有試劑.在檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中,DNA被固定在一種有DNA吸附能力的孔上,羥甲基化的片段會(huì)被捕獲劑以及檢測(cè)抗體識(shí)別,用分光光度計(jì)讀取微孔板在450nm處的比色度定量.羥甲基化的DNA的量與OD值成線(xiàn)性關(guān)系,可以通過(guò)本試劑盒提供的方程來(lái)計(jì)算兩種不同的羥甲基化DNA樣品的相對(duì)羥甲基化狀態(tài)或者通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)完全定量5-mc.基于其工作原理和微孔板模式,本試劑盒可以用于各種物種來(lái)源的多種樣品形式,包括培養(yǎng)的細(xì)胞、新鮮和冷凍的組織、石蠟包埋組織、血漿/血清樣品以及體液樣品.本試劑盒曾經(jīng)對(duì)來(lái)自小鼠大腦和海拉細(xì)胞系的樣品成功地進(jìn)行了5-hmC的定量,所得到的結(jié)果與用HPLC和LC-MS的方法相當(dāng).通過(guò)使用本試劑盒,研究者們首次在正常人類(lèi)腦部組織和結(jié)腸組織中發(fā)現(xiàn)了高豐度的5-hmC.同時(shí),研究結(jié)果還顯示,正常人類(lèi)腦部組織和結(jié)腸組織中5-hmC分別占總甲基化胞嘧啶(5-mC和5-hmC的總和)的32%和16%.相反,在結(jié)腸癌細(xì)胞系(HCT116)和宮頸癌細(xì)胞系(HeLa)中,5-hmC的比率很低,幾乎沒(méi)有.該羥甲基化DNA定量試劑盒(比色法)內(nèi)主要產(chǎn)品組份包括:HC1 (10X Wash Buffer)
HC2 (Binding Solution)
HC3 (Negative Control I, 20 ug/ml)
HC4 (Negative Control II, 20 ug/ml)
HC5 (Positive Control, 20 ug/ml)
HC6 (Capture Antibody, 1000 ug/ml
HC7 (Detection Antibody, 400 ug/ml)
HC8 (Enhancer Solution)
HC9 (Developer Solution)
HC10 (Stop Solution)
8-Well Assay Strips (With Frame)
用戶(hù)指南手冊(cè)
* Spin the solution down to the bottom prior to use.
Note: The HC3 Negative Control I is an unmethylated polynucleotide containing 20% of cytosine. The HC4 Negative Control II is a methylated polynucleotide containing 20% of 5-methylcytosine. The HC5 Positive Control is a hydroxymethylated polynucleotide containing 20% of hydroxymethylcytosine.
產(chǎn)品特點(diǎn)
1、整個(gè)比色法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的操作簡(jiǎn)單易學(xué),方便快捷,只需要3小時(shí)45分鐘就能完成實(shí)驗(yàn).96孔板模式讓您可以根據(jù)自己的需要地選擇用手工或者高通量;2、試劑盒中提供通用陽(yáng)性和陰性對(duì)照,能用于定量檢測(cè)各種來(lái)源的DNA樣品中的羥甲基化狀態(tài),包括哺乳動(dòng)物、植物、真菌、細(xì)菌以及病毒;3、試劑盒中含有定量檢測(cè)全基因組DNA羥甲基化實(shí)驗(yàn)所有用到的試劑,包括陽(yáng)性和陰性對(duì)照.直接測(cè)定比色度的方法來(lái)進(jìn)行定量檢測(cè)取代了已過(guò)時(shí)的和劣質(zhì)的方法,無(wú)須DNA消化/變性、提取,不用使用套色版,不接觸放射性材料;4、本試劑盒用到的新方法和專(zhuān)利試劑使得羥甲基化DNA定量實(shí)驗(yàn)結(jié)果精確、高度靈敏特異,檢測(cè)極限為40 pg的羥甲基化DNA,檢測(cè)范圍寬至40 pg 到 20 ng,檢測(cè)靈敏度是HPLC的十倍(0、008% vs 0、08%),不與DNA上甲基化或者未甲基化胞嘧啶反應(yīng),專(zhuān)一檢測(cè)5-hmC.
已發(fā)表的部分文獻(xiàn): 標(biāo)題:Association of Global DNA Methylation and Global DNA Hydroxymethylation with Metals and other Exposures in Human Blood DNA Samples.作者:Tellez-Plaza M, Tang WY, Shang Y, Umans JG, Francesconi KA, Goessler W, Ledesma M, Leon M, Laclaustra M, Pollak J, Guallar E, Cole SA, Fallin MD, Navas-Acien A;雜志名稱(chēng):Environ Health Perspect 標(biāo)題:Distribution of 5-hydroxymethylcytosine in different human tissues.作者:Li W, Liu M;雜志名稱(chēng):J Nucleic Acids 標(biāo)題:Effect of aging on 5-hydroxymethylcytosine in the mouse hippocampus.作者:Chen H, Dzitoyeva S, Manev H;雜志名稱(chēng):Restor Neurol Neurosci 標(biāo)題:Effect of aging on 5-hydroxymethylcytosine in brain mitochondria.作者:Dzitoyeva S, Chen H, Manev H;雜志名稱(chēng):Neurobiol Aging 標(biāo)題:Effect of valproic acid on mitochondrial epigenetics.作者:Chen H, Dzitoyeva S, Manev H;雜志名稱(chēng):Eur J Pharmacol 標(biāo)題:Methylome profiling reveals distinct alterations in phenotypic and mutational subgroups of myeloproliferative neoplasms.作者:Nischal S, Bhattacharyya S, Christopeit M, Yu Y, Zhou L, Bhagat TD, Sohal D, Will B, Mo Y, Suzuki M, Pardanani A, McDevitt M, Maciejewski JP, Melnick AM, Greally JM, Steidl U, Moliterno A, Verma A;雜志名稱(chēng):Cancer Res 標(biāo)題:Identification of epigenetically altered genes in sporadic amyotrophic lateral sclerosis.作者:Figueroa-Romero C, Hur J, Bender DE, Delaney CE, Cataldo MD, Smith AL, Yung R, Ruden DM, Callaghan BC, Feldman EL;雜志名稱(chēng):PLoS One 標(biāo)題:Use of atorvastatin in systemic lupus erythematosus in children and adolescents.作者:Schanberg LE, Sandborg C, Barnhart HX, Ardoin SP, Yow E, Evans GW, Mieszkalski KL, Ilowite NT, Eberhard A, Imundo LF, Kimura Y, von Scheven E, Silverman E, Bowyer SL, Punaro M, Singer NG, Sherry DD, McCurdy D, Klein-Gitelman M, Wallace C, Silver R, Wagner-Weiner L, Higgins GC, Brunner HI, Jung L, Soep JB, Reed AM, Provenzale J, Tho;雜志名稱(chēng):Arthritis Rheum Epigentek 公司是全球領(lǐng)先的表觀遺傳學(xué)相關(guān)研究的技術(shù)創(chuàng)新者和產(chǎn)品開(kāi)發(fā)供應(yīng)商。開(kāi)發(fā)了超過(guò)700多個(gè)專(zhuān)利產(chǎn)品,為表觀遺傳學(xué)方面的研究和新藥研發(fā)提供全面系統(tǒng)的解決方案,涵蓋樣品制備、DNA/RNA甲基化(5-mc, 5-hmc, 5-fc, m6A)/DNMT分析、ChIP、組蛋白甲基化/乙酰化/去乙酰化/磷酸化/SUMO-等領(lǐng)域,提供小分子抑制劑、蛋白質(zhì)、抗體、以及分析試劑盒產(chǎn)品。