羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）（48次分析）-MethylFlash Hydroxymethylated DNA Quantification Kit(Fluorometric)(48 assays)代理/參數(shù)/廠家-細胞分析試劑盒-艾美捷科技有限公司

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細胞分析試劑盒

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中文名稱: 羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）（48次分析）

英文名字: MethylFlash Hydroxymethylated DNA Quantification Kit(Fluorometric)(48 assays)

供應商: Epigentek

產(chǎn)品貨號: P-1037-48

產(chǎn)品報價: ￥詢價/48Assays

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產(chǎn)品新聞

背景資料: MethylFlash羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）提供了最優(yōu)化的緩沖液和試劑，運用熒光定量的方法，通過檢測微孔板上5-hmC的水平，以定量檢測全基因組的DNA羥甲基化水平.而沒有甲基化和未甲基化胞嘧啶的結(jié)合活性.本試劑盒與MethylFlash DNA羥甲基化定量試劑盒（熒光法）能夠完美配合，用來同時定量檢測DNA的甲基化和羥甲基化水平.
關(guān)于5-hmC
5-hmC是近年來在動物組織中發(fā)現(xiàn)的，由胞嘧啶修飾而來.5-hmC在表觀遺傳學上的功能可能與5-甲基化胞嘧啶（5-mC）不同.盡管到現(xiàn)在為止還不確知其功能，有研究者猜測它在調(diào)控基因的表達與關(guān)閉過程中起著重要的作用.5-mC的發(fā)現(xiàn)讓我們不得不重新評估DNA甲基信息，也不得不監(jiān)測人類的健康組織和病理組織之間5-mC相對分布的差異.在Epigentek的MethylFlash技術(shù)之前，我們還沒有發(fā)現(xiàn)任何直接的常規(guī)方法來檢測5- hmC，以及區(qū)分5-hmC和5-mC.
5-hmC 和 5-mC的區(qū)別
時下常用的DNA甲基化分析方法包括限制內(nèi)切酶酶切和亞硫酸氫鹽或MeDIP介導的MS-PCR和測序，這些技術(shù)都不適合用來檢測5-hmC，因為它與5-mC事實上很難用這類方法區(qū)分開來.為了解決這個問題，Epigentek研制了MethylFlash羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）.本試劑盒提供了一種很經(jīng)濟的方法來檢測5-羥甲基化胞嘧啶，并且區(qū)分5-hmC， 5-mC，和 C，使得研究者能夠重新評估他們的DNA甲基化信息，也能夠在新樣品中尋找DNA羥甲基化.本試劑盒有以下優(yōu)點和特性：
簡單易學方便快捷的熒光分析技術(shù).整個檢測過程只需要3小時20分鐘.
靈敏度高，檢測極限為10pg羥甲基化的DNA
高度的專一性，不與甲基化胞嘧啶和非甲基化的胞嘧啶結(jié)合.5-hmC被專一地堅持.試劑盒中還提供有適用于定量所有物種羥甲基化DNA的普遍陰性對照和陽性對照.
96孔板模式讓您可以根據(jù)自己的需要地選擇用手工或者高通量.
簡單、可靠、檢測條件恒定.

產(chǎn)品描述: MethylFlash羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）中含有定量檢測全基因組羥甲基化所必需的所有試劑.在檢測實驗中，DNA被固定在一種有DNA吸附能力的孔上，羥甲基化的片段會被捕獲劑以及檢測抗體識別，用熒光分光光度計讀取在ex=530 +/-20/em=580 +/-20 nm處的熒光強度來定量.羥甲基化的DNA的量與熒光強度值成線性關(guān)系，可以通過本試劑盒提供的方程來計算兩種不同的羥甲基化DNA樣品的相對羥甲基化狀態(tài)或者通過標準曲線完全定量5-mc.基于其工作原理和微孔板模式，本試劑盒可以用于各種物種來源的多種樣品形式，包括培養(yǎng)的細胞、新鮮和冷凍的組織、石蠟包埋組織、血漿/血清樣品以及體液樣品.本試劑盒曾經(jīng)對來自小鼠大腦和海拉細胞系的樣品成功地進行了5-hmC的定量，所得到的結(jié)果與用HPLC和LC-MS的方法相當.通過使用本試劑盒，研究者們首次在正常人類腦部組織和結(jié)腸組織中發(fā)現(xiàn)了高豐度的5-hmC.同時，研究結(jié)果還顯示，正常人類腦部組織和結(jié)腸組織中5-hmC分別占總甲基化胞嘧啶（5-mC和5-hmC的總和）的32%和16%.相反，在結(jié)腸癌細胞系（HCT116）和宮頸癌細胞系（HeLa）中，5-hmC的比率很低，幾乎沒有. 該羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）內(nèi)主要產(chǎn)品組份包括：HF1 （10X Wash Buffer） HF2 （Binding Solution） HF3 （Negative Control I， 20 ug/ml） HF4 （Negative Control II， 20 ug/ml） HF5 （Positive Control， 20 ug/ml） HF6 （Capture Antibody， 1000 ug/ml HF7 （Detection Antibody， 400 ug/ml） HF8 （Enhancer Solution） HF9 （Fluoro Developer） HF10 （Fluoro Enhancer） HF11 （Fluoro Dilutor） 8-Well Assay Strips （With Frame）用戶指南手冊

產(chǎn)品特點: 1、整個比色法檢測實驗的操作簡單易學，方便快捷，只需要3小時45分鐘就能完成實驗.96孔板模式讓您可以根據(jù)自己的需要地選擇用手工或者高通量；2、試劑盒中提供通用陽性和陰性對照，能用于定量檢測各種來源的DNA樣品中的羥甲基化狀態(tài)，包括哺乳動物、植物、真菌、細菌以及病毒；3、試劑盒中含有定量檢測全基因組DNA羥甲基化實驗所有用到的試劑，包括陽性和陰性對照.直接測定熒光強度的方法來進行定量檢測取代了已過時的和劣質(zhì)的方法，無須DNA消化/變性、提取，不用使用套色版，不接觸放射性材料；4、試劑盒用到的新方法和專利試劑使得羥甲基化DNA定量實驗結(jié)果精確、高度靈敏特異，檢測極限為40 pg的羥甲基化DNA，檢測范圍寬至40 pg 到 20 ng，檢測靈敏度是HPLC的十倍（0、008% vs 0、08%），不與DNA上甲基化或者未甲基化胞嘧啶反應，特異檢測5-hmC.

保存建議: 請在您收到Epigentek的羥甲基化DNA定量試劑盒（熒光法）（48次分析）產(chǎn)品后，參考說明書建議，使用不同的保存條件或溫度來保存試劑盒內(nèi)組分.

其他: 已發(fā)表的部分文獻：
標題：5-Hydroxymethylcytosine Is Not Present in Appreciable Quantities in Arabidopsis DNA.作者：Erdmann RM, Souza AL, Clish CB, Gehring M；雜志名稱：G3 (Bethesda)
標題：DNA Methylation and Hydroxymethylation Levels in Relation to Two Weight Loss Strategies: Energy-Restricted Diet or Bariatric Surgery.作者：Nicoletti CF, Nonino CB, de Oliveira BA, Pinhel MA, Mansego ML, Milagro FI, Zulet MA, Martinez JA；雜志名稱：Obes Surg
標題：Fructose consumption induces hypomethylation of hepatic mitochondrial DNA in rats.作者：Yamazaki M, Munetsuna E, Yamada H, Ando Y, Mizuno G, Murase Y, Kondo K, Ishikawa H, Teradaira R, Suzuki K, Ohashi K；雜志名稱：Life Sci
標題：Global methylation and hydroxymethylation patterns of bovine tissues作者：Mendon?§a A. S., Braga T. F., Melo E.,Dode M. A. N. , Franco M. M.；雜志名稱：Brazilian College of Animal Reproduction
標題：Global changes of 5-hydroxymethylcytosine and 5-methylcytosine from normal to tumor tissues are associated with carcinogenesis and prognosis in colorectal cancer作者：Yi-ping TIAN, Ai-fen LIN, Mei-fu GAN, Hao WANG, Dan YU, Chong LAI , Dan-dan ZHANG1,2, Yi-min ZHU, Mao-de LAI；雜志名稱：JZUSB
標題：Evaluating the Feasibility of DNA Methylation Analyses Using Long-Term Archived Brain Formalin-Fixed Paraffin-Embedded Samples.作者：Bak ST, Staunstrup NH, Starnawska A, Daugaard TF, Nyengaard JR, Nyegaard M, B??rglum A, Mors O, Dorph-Petersen KA, Nielsen AL；雜志名稱：Mol Neurobiol
標題：Hinokitiol induces DNA demethylation via DNMT1 and UHRF1 inhibition in colon cancer cells.作者：Seo JS, Choi YH, Moon JW, Kim HS, Park SH；雜志名稱：BMC Cell Biol
標題：Modulation of ten-eleven translocation 1 (TET1), Isocitrate Dehydrogenase (IDH) expression, ?±-Ketoglutarate (?±-KG), and DNA hydroxymethylation levels by interleukin-1?2 in primary human chondrocytes.作者：Haseeb A, Makki MS, Haqqi TM；雜志名稱：J Biol Chem
Epigentek 公司是全球領(lǐng)先的表觀遺傳學相關(guān)研究的技術(shù)創(chuàng)新者和產(chǎn)品開發(fā)供應商。開發(fā)了超過700多個專利產(chǎn)品，為表觀遺傳學方面的研究和新藥研發(fā)提供全面系統(tǒng)的解決方案，涵蓋樣品制備、DNA/RNA甲基化（5-mc, 5-hmc, 5-fc, m6A）/DNMT分析、ChIP、組蛋白甲基化/乙酰化/去乙酰化/磷酸化/SUMO-等領(lǐng)域，提供小分子抑制劑、蛋白質(zhì)、抗體、以及分析試劑盒產(chǎn)品。