Hypoxyprobe?-1 Omni試劑盒組分的詳細(xì)信息

1) Hypoxyprobe?-1是一種取代的2-硝基咪唑，其化學(xué)名稱和唯一成分是pimonidazole鹽酸鹽。Hypoxyprobe?-1的分子量為290.8；水溶性為400毫摩爾，相當(dāng)于116毫克/毫升；在324納米處有紫外吸收，消光系數(shù)為7020，在0.9%的鹽水中。其游離堿，pimonidazole，分子量為254.3，pKa值為8.7，辛醇水分配系數(shù)為8.5。

Hypoxyprobe?-1在固體形式和水溶液中化學(xué)穩(wěn)定。例如，固體Hypoxyprobe-1在室溫下昏暗光線中儲(chǔ)存兩年，通過紫外和HPLC分析未檢測到降解。0.9%鹽水中的Hypoxyprobe?-1溶液以100克/升的濃度在4°C下儲(chǔ)存4.5年，未檢測到降解（紫外和HPLC分析）。

Pimonidazole在缺氧細(xì)胞中通過還原激活。激活的中間體與蛋白質(zhì)、肽和氨基酸中的巰基（硫醇）基團(tuán)形成穩(wěn)定的共價(jià)加合物。抗體試劑PAb2627AP與這些加合物結(jié)合，允許通過免疫化學(xué)方法檢測它們。

2) PAb2627AP是一種親和純化的兔抗體制劑，與缺氧細(xì)胞中Hypoxyprobe?-1的蛋白質(zhì)加合物結(jié)合。PAb2627AP含有疊氮化鈉以增加穩(wěn)定性。感興趣的組織可以通過冷凍固定或甲醛固定的石蠟包埋切片的免疫組化；西方印跡法；或在組織解離后的流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行研究。

注意：PAb2627AP與缺氧細(xì)胞中pimonidazole的蛋白質(zhì)、肽和氨基酸加合物結(jié)合，但組織處理以準(zhǔn)備免疫組化測定時(shí)會(huì)洗去小分子肽和氨基酸加合物，因此免疫組化缺氧檢測依賴于缺氧組織中pimonidazole的蛋白質(zhì)加合物。

作為Hypoxyprobe在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Hypoxyprobe熱銷產(chǎn)品Hypoxyprobe Omni試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Hypoxyprobe Omni試劑盒：

應(yīng)用：通過免疫熒光或免疫過氧化物酶染色、西方印跡法或流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞和組織缺氧的免疫化學(xué)檢測。當(dāng)Hypoxyprobe?-1 Omni試劑盒與抗兔二抗試劑（Omni試劑盒中不提供的二抗試劑）結(jié)合使用時(shí)，在小鼠組織中的背景非常低。

數(shù)量：a. Hypoxyprobe?-1 Omni試劑盒包含100毫克、200毫克或1000毫克的Hypoxyprobe?1（pimonidazole HCl）。典型的劑量是小動(dòng)物研究每公斤體重60毫克，人類研究每公斤體重14毫克。

b. 一盒（100毫克和200毫克試劑盒）或兩盒（1000毫克試劑盒）200微升的親和純化抗pimonidazole兔抗血清，含有0.09%的疊氮化鈉和1%的牛血清白蛋白作為穩(wěn)定劑。PAb2627AP的最佳稀釋度由每位研究者確定，但發(fā)現(xiàn)1/50至1/200的稀釋度在與過氧化物酶標(biāo)記的山羊抗兔抗血清結(jié)合時(shí)，對(duì)小鼠腫瘤組織進(jìn)行免疫染色效果強(qiáng)烈。

不提供：抗兔二抗試劑和標(biāo)準(zhǔn)IHC試劑，如緩沖液、底物色素原等。

儲(chǔ)存：a. 將Hypoxyprobe?-1固體存放在室溫下的暗處（也可以存放在28攝氏度）。

b. 將兔PAb2627AP存放在2-8攝氏度。不要冷凍。

測定說明

1. 對(duì)正常或腫瘤組織缺氧的研究始于靜脈輸注、腹腔注射或口服Hypoxyprobe?-1溶液，動(dòng)物劑量為每公斤體重60毫克，人類為每公斤體重14毫克。對(duì)于一只25克的小鼠，這相當(dāng)于每只小鼠1.5毫克。在小鼠中已使用高達(dá)每公斤體重400毫克的劑量，未檢測到毒性或組織缺氧的變化，但每公斤體重60毫克可在最低成本下獲得良好的免疫染色。Hypoxyprobe?-1在鹽水中的溶解度為116毫克/毫升，因此可以使用非常小的體積來施用Hypoxyprobe?-1。

注射或攝取后，Hypoxyprobe?-1分布到所有組織，包括大腦，但它僅與那些氧氣濃度低于14微摩爾的細(xì)胞中的含巰基蛋白質(zhì)形成加合物——相當(dāng)于在37°C時(shí)的氧分壓pO2 = 10毫米汞柱。除了腫瘤，正常組織如肝臟、腎臟和皮膚也擁有pO2為10毫米汞柱或更低的細(xì)胞。這些正常組織會(huì)結(jié)合Hypoxyprobe?-1。

小鼠體內(nèi)Hypoxyprobe?-1的血漿半衰期大約為25分鐘。相比之下，大鼠的血漿半衰期為45分鐘，狗為90分鐘，人類為300分鐘。感興趣的小鼠組織可在Hypoxyprobe?-1給藥后15至90分鐘內(nèi)收獲。收獲時(shí)組織中的Hypoxyprobe?-1將在組織缺氧時(shí)結(jié)合。然而，與組織在15至90分鐘實(shí)驗(yàn)過程中暴露的量相比，殘留的Hypoxyprobe?-1的量非常小，因此由于殘留的Hypoxyprobe?-1引起的任何非特異性結(jié)合都是不可檢測的。

除了動(dòng)物研究，Hypoxyprobe?試劑盒還可用于組織培養(yǎng)中的細(xì)胞。通常，細(xì)胞懸浮液在缺氧條件下與100至200微摩爾的Hypoxyprobe?-1一起孵育1至2小時(shí)。通過細(xì)胞旋轉(zhuǎn)收獲細(xì)胞，固定并用PAb2627PA和顯色或熒光二抗進(jìn)行免疫染色。

Hypoxyprobe, Inc.（缺氧探針公司）專注于研發(fā)非侵略性的缺氧標(biāo)志物（Hypoxia maker）和缺氧依賴性的細(xì)胞因子，所有產(chǎn)品皆基于Pimonidazole核心結(jié)構(gòu)來開發(fā)。 使用Pimonidazole HCl作為缺氧標(biāo)記物，廣泛用在狗、大小鼠。缺氧探針試劑盒核心組分為：缺氧探針（Pimonidazole 或CCI-103F）和缺氧探針的抗體。不同試劑盒中的探針和抗體標(biāo)記不同（可應(yīng)用于免疫熒光（IF），免疫組化（IHC），WB或流式細(xì)胞分析（FC））

艾美捷科技是Hypoxyprobe的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。