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<img src="{{media url=“wysiwyg/82215.png”}}”alt="”width=“778”height=“300”/>圖1:Ubi-Trans? UBA 6-UbcH 5 b TR-FRET檢測試劑盒示意圖。
在ATP存在下,UBE 6(E1)將生物素結(jié)合的泛素轉(zhuǎn)移到底物UbcH 5 b(E2)。Tb標(biāo)記的抗His抗體與His標(biāo)記的E2綴合蛋白結(jié)合,而染料標(biāo)記的鏈霉親和素受體與生物素-泛素結(jié)合。當(dāng)泛素被E1轉(zhuǎn)移到E2酶時,復(fù)合物形成。在沒有泛素化的情況下,復(fù)合物不會形成,能量轉(zhuǎn)移也不會發(fā)生。當(dāng)E2被泛素化時,復(fù)合物形成,TR-FRET配對完成,并且觀察到受體發(fā)射的增加。因此,TR-FRET信號與UBE 6活性成比例。
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