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a)可能因為你的蛋白沒有變性完全，可以適當(dāng)提高SDS 濃度，同時將樣品煮沸時間延長 

b)也不排除你的抗原濃度過高，這時再加入適量上樣緩沖液即可。

原因有很多： 

a)你的細(xì)胞中不表達(dá)這種蛋白質(zhì)，換一種細(xì)胞；

b)你的細(xì)胞中的蛋白質(zhì)被降解掉了，你必需加入 PMSF，抑制蛋白酶活性；

c)你的抗體不能識別目標(biāo)蛋白，多看看說明，看是否有問題。

靈敏，可達(dá)ng 級，用Ecl 顯色法理論上可達(dá)pg 級。方便，特異性高。