酸性磷酸酶（ACP）是一種在消化過程中催化磷酸基團(tuán)從其他分子上水解的酶。酸性磷酸酶存在于溶酶體中，并在與內(nèi)體融合后激活，內(nèi)體酸化pH值，從而為ACP創(chuàng)造了最佳的活性環(huán)境。ACP還存在于骨骼、脾臟、肝臟、腎臟和血液中。血清中的ACP水平可以作為前列腺癌的生物標(biāo)志物，盡管前列腺特異性抗原（PSA）更為廣泛使用。

BioAssay Systems的非放射性熒光法ACP測(cè)定基于合成底物的水解。產(chǎn)物甲基傘形酮（MUB）在加入終止試劑后會(huì)發(fā)出強(qiáng)烈的熒光。加入終止試劑后在360/450納米處熒光強(qiáng)度的增加與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品酸性磷酸酶測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

酸性磷酸酶測(cè)定試劑盒：

主要特點(diǎn)：

- 快速且靈敏：線性檢測(cè)范圍（20微升樣本）：0.008到10 U/L，反應(yīng)時(shí)間為30分鐘。  

- 便捷且高通量：均質(zhì)“混合-孵育-測(cè)量”型測(cè)定。可輕松在高通量篩選液體處理系統(tǒng)上自動(dòng)化操作，每天可處理數(shù)千個(gè)樣本。

應(yīng)用范圍：

- 生物樣本中酸性磷酸酶活性的測(cè)定（例如血漿、血清、細(xì)胞裂解液、組織樣本）。

試劑盒組成（96孔板，100次測(cè)試）：

- 測(cè)定緩沖液：12毫升  

- MUB底物：120微升  

- 終止試劑：12毫升  

- 標(biāo)準(zhǔn)品：120微升  

儲(chǔ)存條件：

- 試劑盒在室溫下運(yùn)輸。收到后將所有組分儲(chǔ)存于-20攝氏度。有效期：收到后6個(gè)月。

注意事項(xiàng)：

- 試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)預(yù)防措施。請(qǐng)參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

操作步驟：

該測(cè)定基于動(dòng)力學(xué)反應(yīng)。為確保孵育時(shí)間一致，加入底物和終止試劑到樣本中的操作應(yīng)迅速，混合應(yīng)簡(jiǎn)短但徹底。建議使用多通道移液器。

樣本準(zhǔn)備：

- 血清和血漿：應(yīng)稀釋2-5倍。  

- 組織：在解剖前，用Tris緩沖鹽水（pH 7.4）沖洗組織以去除血液。將組織（50毫克）在約200微升50毫摩爾/升Tris緩沖液（pH 7.5）中勻漿。在4攝氏度下以14,000g離心10分鐘。取上清液用于測(cè)定。  

- 細(xì)胞裂解液：通過在4攝氏度下以2,000g離心5分鐘收集細(xì)胞。對(duì)于貼壁細(xì)胞，不要使用蛋白酶酶收獲細(xì)胞，而是使用橡膠刮刀。在適量的冷50毫摩爾/升Tris緩沖液（pH 7.5）中勻漿或超聲處理細(xì)胞，每毫升約一百萬細(xì)胞。在4攝氏度下以14,000g離心10分鐘。取上清液用于測(cè)定。  

- 所有樣本：可在-80至-20攝氏度下儲(chǔ)存至少一個(gè)月。

試劑準(zhǔn)備：

將所有組分平衡至所需的反應(yīng)溫度（例如25攝氏度或37攝氏度）。

標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：

將25微升標(biāo)準(zhǔn)品（MUB）與475微升去離子水混合，制備100微摩爾/升的預(yù)混液。

反應(yīng)準(zhǔn)備：

1. 將每個(gè)樣本的20微升分別加入不同的孔中。將每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的20微升加入黑色平底96孔板的孔中。  

2. 每孔將85微升測(cè)定緩沖液和1微升MUB底物混合，制備工作試劑。將80微升工作試劑加入所有標(biāo)準(zhǔn)品和樣本孔中。輕拍孔板以混合。  

3. 在25攝氏度或所需溫度下孵育30分鐘。向每個(gè)孔中加入50微升終止試劑。輕拍孔板以混合。  

4. 在360/450納米處讀取熒光。

所需材料（但未提供）：

- 移液裝置及配件（例如多通道移液器）、黑色平底96孔板（例如VWR產(chǎn)品編號(hào)89089-582）、離心管和酶標(biāo)儀。

文獻(xiàn)參考：

1. Henneberry, M.O.; Engel, G.; Grayhack, J.T. (October 1979). “Acid Phosphatase”. The Urologic clinics of North America 6 (3): 629–41.

2. Bull, H.; Murray, P.G.; Thomas, D.; Fraser, A.M.; Nelson, P.N. (April 2002). “Acid Phosphatases”. Molecular Pathology 55 (2): 65–72.Retrieved 11 May 2015.

3. Taira A, Merrick G, Wallner K, Dattoli M (July 2007). "Reviving the acid phosphatase test for prostate cancer". Oncology (Williston Park,N.Y.) 21 (8): 1003–10. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。