尿激酶型纖溶酶原激活劑（尿激酶，uPA）是一種關鍵的絲氨酸蛋白酶，參與細胞外基質的降解，并催化纖溶酶原轉化為活性纖溶酶。它作為一種溶栓劑，能夠分解血栓，而在過表達時，已被報道會影響某些惡性腫瘤（如乳腺癌、前列腺癌等）的生長。BioAssay Systems的DUKN-100試劑盒提供了一種便捷的熒光法方法，用于檢測生物樣本中的尿激酶活性。在此檢測中，熒光底物與尿激酶反應，熒光強度在λex/em = 380/450 nm處的增加與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品尿激酶測定試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

尿激酶測定試劑盒：

主要特點：

- 安全。非放射性檢測。

- 快速。檢測在15分鐘內完成。

- 靈敏且準確。在96孔板檢測中，尿激酶的線性檢測范圍為0.04 - 30 U/L。

- 方便且高通量。均質的“混合-孵育-測量”類型檢測，可輕松自動化，每天檢測數千個樣本。

應用范圍：

用于生物樣本中尿激酶活性的定量檢測。

試劑盒組成（96孔板檢測100次）：

- 檢測緩沖液：10 mL

- 2.5 mM標準品：40 ?L

- 底物：600 ?L

儲存條件：

試劑盒在室溫下運輸。收貨后將所有組分儲存于-20°C。有效期：收貨后12個月。

注意事項：

試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規(guī)預防措施。詳細信息請參閱材料安全數據表。

操作步驟：

本檢測基于動力學反應。為確保孵育時間一致，向樣本中加入工作試劑（WR）時應迅速，混合應簡短但充分。建議使用多通道移液器。檢測可在室溫下進行。

試劑準備：

在檢測前，將所有組分平衡至室溫，并在打開前短暫離心試管。每次檢測應新鮮配制工作試劑（WR）。

酶準備：

酶應在酶緩沖液中配制，例如50 mM Tris-HCl，pH 7.4，100 mM NaCl，0.08% BSA。以下協(xié)議針對Cell Sciences（產品編號CRU000A）的天然人尿激酶型纖溶酶原激活劑進行了優(yōu)化。如果使用不同的酶，建議通過實驗確定每孔使用的最佳酶量。

樣本準備：

- 血清可直接檢測。

- 尿液應在檢測前用去離子水稀釋2倍或更高倍數。

反應準備：

1. 將每個樣本的10 ?L分別加入平板的不同孔中。

2. 通過將每個孔的5 ?L底物和90 ?L檢測緩沖液混合，為所有樣本孔準備好工作試劑。

3. 向所有樣本孔中加入90 ?L工作試劑。輕拍平板以混合均勻，并孵育15分鐘。在λex/em = 380/450 nm處測量熒光強度。

實驗結果：

對一個人類血清樣本和一個人類尿液樣本進行了尿激酶活性檢測。基線水平分別為0.085 U/L和0.012 U/L。

文獻參考：

1. Law, B. et al. (2004). Design, Synthesis, and Characterization of Urokinase Plasminogen-Activator-Sensitive Near-Infrared Reporter.Chemistry & Biology. 11, 99–106.

2. Mahmood N, Mihalcioiu C and Rabbani SA (2018) Multifaceted Role of the Urokinase-Type Plasminogen Activator (uPA) and Its Receptor (uPAR): Diagnostic, Prognostic, and Therapeutic Applications. Front.Oncol. 8, 24.

3. Mazar, A. (2008). Urokinase Plasminogen Activator Receptor Choreographs Multiple Ligand Interactions: Implications for Tumor Progression and Therapy. Clin Cancer Res. 14 (18), 5649 –5655. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術生物技術公司，專注于研發(fā)、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發(fā)現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。