對于許多過氧化物酶來說，最佳底物是過氧化氫（H?O?），但其他過氧化物酶在有機過氧化物（如脂質(zhì)過氧化物）存在時活性更高。在細(xì)胞中，過氧化物酶能夠破壞在有氧呼吸過程中作為副產(chǎn)物形成的有毒羥基自由基。過氧化物酶是一個大家族的酶，存在于動物（例如髓過氧化物酶類酶）、植物、真菌和細(xì)菌（細(xì)胞色素c過氧化物酶類酶，如辣根過氧化物酶）中。

簡單、直接且適合自動化的檢測過氧化物酶活性的程序具有廣泛的應(yīng)用。BioAssay Systems的過氧化物酶檢測試劑盒使用H?O?和一種電子供體染料，在過氧化物酶反應(yīng)過程中生成甲臜。吸光度（570 nm）或熒光強度（激發(fā)波長/發(fā)射波長=530/585 nm）是酶活性的直接測量指標(biāo)。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品過氧化物酶測定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點：

- 安全。非放射性實驗。

- 靈敏且準(zhǔn)確。使用低至10 ?L的樣本。線性檢測范圍：比色法檢測為2到50 U/L，熒光法檢測為0.1到5 U/L過氧化物酶。

- 便捷且高通量。“混合-孵育-測量”型實驗。可以輕松與高通量篩選（HTS）液體處理系統(tǒng)自動化配合使用。

應(yīng)用：

生物樣本（例如血漿、血清、尿液、組織和培養(yǎng)基）中過氧化物酶活性的測定。

試劑盒內(nèi)容：

- 檢測緩沖液：20 mL

- 終止試劑：12 mL

- 甲臜：1.5 mL

- 染料試劑：60 ?L

- 3%穩(wěn)定化H?O?：100 ?L

儲存條件：試劑盒在室溫下運輸。將檢測緩沖液、染料試劑和甲臜儲存于-20°C。3%穩(wěn)定化H?O?應(yīng)在-20°C到4°C之間儲存。終止試劑可在-20°C到室溫之間儲存。保質(zhì)期：收到后12個月。

注意事項：試劑僅供研究使用。使用試劑時應(yīng)遵循實驗室試劑的常規(guī)注意事項。請參考材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

實驗步驟：

樣本準(zhǔn)備：樣本可以根據(jù)已建立的方法進(jìn)行準(zhǔn)備[1-3]。為了確保活性在檢測范圍內(nèi)，建議測試多個樣本稀釋度。

試劑準(zhǔn)備：實驗前，將所有試劑恢復(fù)至室溫。將3% H?O?用檢測緩沖液稀釋至0.6%，并在一小時內(nèi)使用。

比色法操作步驟：

1. 在透明平底96孔板的兩個孔中分別加入100 ?L去離子水和100 ?L甲臜。

   - 在單獨的孔中分別加入10 ?L去離子水（樣本空白）和10 ?L樣本。

   - 通過混合以下試劑為所有樣本孔準(zhǔn)備足夠的工作試劑（WR）：對于每個孔，加入95 ?L檢測緩沖液、0.5 ?L染料試劑和0.5 ?L新稀釋的0.6% H?O?。向每個樣本孔加入90 ?L工作試劑。輕拍平板以混合均勻，并在室溫下孵育10分鐘。

2. 向所有孔中加入100 ?L終止試劑。輕拍平板以混合均勻，并在570 nm處讀取吸光度。

熒光法操作步驟：

對于熒光法實驗，線性檢測范圍為0.1到5 U/L。將甲臜用去離子水稀釋1:10。

1. 在黑色平底96孔板的兩個孔中分別加入100 ?L去離子水和100 ?L稀釋后的甲臜。

- 在單獨的孔中分別加入10 ?L去離子水和10 ?L樣本。

- 通過混合以下試劑為所有樣本孔準(zhǔn)備足夠的工作試劑（WR）：對于每個孔，加入95 ?L檢測緩沖液、0.5 ?L染料試劑和0.5 ?L新稀釋的0.6% H?O?。向每個孔加入90 ?L工作試劑。輕拍平板以混合均勻，并在室溫下孵育10分鐘。

2. 向所有孔中加入100 ?L終止試劑。輕拍平板以混合均勻，并在激發(fā)波長/發(fā)射波長為530/585 nm處讀取熒光強度。

文獻(xiàn)參考：

1. Wada, A., et al. (2021). Protective effect of luminal uric acid against indomethacin-induced enteropathy: Role of antioxidant effect and gut microbiota. Digestive Diseases and Sciences.

2. Jeon, G., et al. (2021). Melanin-decolorizing activity of antioxidant enzymes, glutathione peroxidase, thiol peroxidase, and catalase.Molecular Biotechnology 63(2): 150-155.

3. Sharma, S., et al. (2020). Heat-induced endoplasmic reticulum stress in soleus and gastrocnemius muscles and differential response to UPR pathway in rats. Cell Stress & Chaperones.

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。