乙酰乙酸是肝臟主要通過脂肪酸氧化產(chǎn)生的三種酮體之一，通常在尿液和血液中以低濃度存在。血液中酮體濃度增加可能導致代謝性酸中毒，這與糖尿病、兒童低血糖、生長激素缺乏癥、酒精或水楊酸鹽中毒以及先天性代謝錯誤有關。乙酰乙酸是一種不穩(wěn)定的酮體，會自發(fā)脫羧釋放二氧化碳和丙酮。

簡單、直接且適合自動化的乙酰乙酸（AAT）檢測程序是非常理想的。BioAssay Systems的QuantiChrom?乙酰乙酸檢測試劑盒基于與亞硝基鐵氰化鈉的反應，生成在550 nm處有吸收的產(chǎn)品。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品乙酰乙酸測定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點：

- 靈敏且準確。96孔板檢測中乙酰乙酸的線性檢測范圍為0.012到1 mM（1.2 - 100 nmol/孔）。

- 便捷。無需樣本預處理。操作流程包括加入單一工作試劑，并在室溫下以動力學模式讀取吸光度。

- 高通量。可以作為高通量96孔板檢測，每天處理數(shù)千個樣本。

試劑盒內(nèi)容（96孔板100次測試）：

- AAT緩沖液：10 mL

- AAT試劑：1 mL

- AAT標準品：干燥

應用：直接檢測血清、血漿、尿液和其他生物樣本中的乙酰乙酸。

儲存條件：試劑盒在室溫下運輸。將所有試劑儲存于-20°C。保質(zhì)期：收到后6個月，AAT標準品復溶后應在2個月內(nèi)使用。

注意事項：試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規(guī)注意事項。請參考材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細信息。

實驗步驟：

- 樣本：血清和血漿樣本應無溶血，并立即進行檢測。如果不能立即檢測，樣本可以在-80°C下儲存長達30天。

- 試劑準備：實驗前將所有試劑恢復至室溫。用100 ?L去離子水復溶AAT標準品管（最終濃度100 mM）。未使用的AAT標準品在-20°C冷凍保存時穩(wěn)定兩個月。

實驗操作：

1. 標準品準備：將2 ?L AAT標準品與198 ?L蒸餾水混合，制備1 mM AAT標準品。

2. 樣本準備：將每個樣本的10-100 ?L分別轉(zhuǎn)移到單獨的孔中，并用去離子水補足至最終體積100 ?L。

3. 反應：通過混合每個孔的95 ?L AAT緩沖液和10 ?L AAT試劑來制備工作試劑。向每個孔加入100 ?L工作試劑。輕輕敲擊平板以混合均勻。

4. 孵育：在室溫下避光孵育，并在動力學模式下讀取30分鐘的550 nm吸光度。根據(jù)最大吸光度處的吸光度值計算乙酰乙酸濃度。

注意事項：

如果計算出的[AAT] > 1 mM，需用去離子水稀釋樣本并重復檢測。將結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。如果預計乙酰乙酸水平較低或可能存在基質(zhì)效應，建議加入內(nèi)標。需要內(nèi)標的樣本需要進行兩個單獨的反應：1）樣本加內(nèi)標；2）單獨樣本。對于樣本加標準品的孔，向80 ?L樣本中加入20 ?L 1 mM AAT標準品。對于單獨樣本的孔，向80 ?L樣本中加入20 ?L去離子水。按照正常檢測的步驟（標準品和反應）進行后續(xù)操作。

乙酰乙酸（AAT）標準曲線（左）。使用內(nèi)標檢測人血漿、血清和尿液中的乙酰乙酸水平（右）。

文獻參考：

1. Matsuura, TR et al (2023) Ketones and the Heart : Metabolic Principles and Therapeutic Implications. Circ. Res. 132(7) :882-898.

2. Saito, T., et al. (2019). Autophagy regulates lipid metabolism through selective turnover of NCoR1. Nature communications 10(1):1567.

3. Martin-Murphy, BV et al (2013). Increased susceptibility of natural killer T-cell-deficient mice to acetaminophen-induced liver injury.Hepatology 57.4: 1575-1584. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術生物技術公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學研究的檢測試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。