一氧化氮（NO）是一種具有反應(yīng)性的自由基，在許多關(guān)鍵生理功能中發(fā)揮著重要作用。一氧化氮是精氨酸在一氧化氮合酶作用下的氧化產(chǎn)物，參與宿主防御和發(fā)育、調(diào)節(jié)蛋白的激活以及與功能生物分子的直接共價(jià)相互作用。

簡(jiǎn)單、直接且適合自動(dòng)化的檢測(cè)一氧化氮（NO）的程序在研究和藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域越來越受歡迎。由于一氧化氮會(huì)被氧化為亞硝酸鹽和硝酸鹽，因此通常通過定量總亞硝酸鹽/硝酸鹽（NO??/NO??）來衡量一氧化氮水平。BioAssaySystems的QuantiChrom?一氧化氮檢測(cè)試劑盒旨在通過改進(jìn)的格里耶斯（Griess）方法，準(zhǔn)確測(cè)量通過將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽來檢測(cè)一氧化氮的產(chǎn)生。該程序簡(jiǎn)單，樣本預(yù)處理和檢測(cè)所需的時(shí)間縮短至僅需30分鐘。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品一氧化氮測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)：

-靈敏且準(zhǔn)確。96孔板的檢測(cè)范圍為0.6-100?M。

-快速且可靠。使用優(yōu)化的三氯化釩（VCl?）試劑，將NO??還原為NO??僅需在60°C下10分鐘。

-簡(jiǎn)單且高通量。該程序包括將樣本與三種試劑混合，在60°C下孵育10分鐘，并讀取吸光度。可以輕松自動(dòng)化，每天測(cè)量數(shù)千個(gè)樣本。

應(yīng)用：

-直接檢測(cè)：血漿、血清、尿液、組織/細(xì)胞和食品中的NO。

-藥物發(fā)現(xiàn)/藥理學(xué)：藥物對(duì)NO代謝的影響。

試劑盒內(nèi)容（96孔板100次測(cè)試）：

-試劑A：12mL

-試劑B：500?L

-試劑C：12mL

-氫氧化鈉（NaOH）：1mL

-硫酸鋅（ZnSO?）：1mL

-標(biāo)準(zhǔn)品：1mL

儲(chǔ)存條件：試劑盒在室溫下運(yùn)輸。將標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)存于-20°C，其他所有試劑儲(chǔ)存于-20到4°C。保質(zhì)期：收到后六個(gè)月。

注意事項(xiàng)：試劑僅供研究使用。請(qǐng)參考材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

實(shí)驗(yàn)步驟：

實(shí)驗(yàn)前，將所有組分平衡至室溫。如果試劑B中有沉淀，可在37?C下加熱至重新溶解（約10-15分鐘）。

樣本處理：

-組織或細(xì)胞樣本在1×PBS（pH7.4）中勻漿。在4°C下以14,000rpm離心。取上清液用于NO檢測(cè)。

-需要脫蛋白的樣本包括血清、血漿、全血、含有胎牛血清（FBS）的細(xì)胞培養(yǎng)基、組織或細(xì)胞裂解液。尿液和唾液不需要脫蛋白。

脫蛋白：

在1.5-mL試管中將150?L樣本與8?LZnSO?混合。渦旋后加入8?LNaOH，再次渦旋并以14,000rpm離心10分鐘。將100?L澄清的上清液轉(zhuǎn)移到干凈的試管中。

注意：如果樣本需要脫蛋白，應(yīng)準(zhǔn)備150?L的每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品，并同樣用ZnSO?和NaOH處理，以避免稀釋因子的影響。

需要但未提供的材料：

移液裝置、Eppendorf管、Eppendorf離心機(jī)、透明平底96孔板或比色皿、平板讀數(shù)器或分光光度計(jì)以及加熱塊或熱水浴（可選）。

一般注意事項(xiàng)：

抗氧化劑和親核試劑（例如β-巰基乙醇、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇和半胱氨酸）可能會(huì)干擾該實(shí)驗(yàn)。在樣本準(zhǔn)備過程中避免使用這些化合物。

96孔板實(shí)驗(yàn)中的標(biāo)準(zhǔn)曲線

文獻(xiàn)參考：

1. Kim, H.-C., et al. (2019). Cobalt(Ii)-coordination polymers containing glutarates and bipyridyl ligands and their antifungal potential. Scientific Reports 9(1).

2. Kang, M., et al. (2020). Plasma mediated disinfection of rice seeds in water and air. Journal of Physics D: Applied Physics 53(21).

3. Veerana, M., et al. (2021). Analysis of the effects of Cu-MOFs on fungal cell inactivation. RSC Advances 11(2): 1057-1065.

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。