活性氧對細胞關(guān)鍵成分的氧化攻擊與多種人類疾病有關(guān)，例如動脈粥樣硬化、心血管疾病、糖尿病、肝臟疾病和炎癥性風(fēng)濕病。

硫代巴比妥酸反應(yīng)性物質(zhì)（TBARS）是脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物分解過程中形成的小分子終產(chǎn)物（主要是丙二醛，MDA）。在這些疾病中，TBARS水平已被證明是升高的。簡單、直接且準確的TBARS檢測方法在研究和藥物發(fā)現(xiàn)中具有廣泛的應(yīng)用。BioAssaySystems的TBARS檢測基于TBARS與硫代巴比妥酸（TBA）的反應(yīng)，生成粉紅色產(chǎn)物。在535nm處的吸光強度或在（λex/em=530nm/550nm）處的熒光強度與樣本中的TBARS濃度成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品TBARS測定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

TBARS測定試劑盒主要特點：

-靈敏且準確。線性檢測范圍：比色法檢測為1-30?M，熒光法檢測為0.1-1.5?MMDA。

應(yīng)用范圍：

-直接檢測：血清、血漿、尿液、唾液和其他生物樣本。

-藥物發(fā)現(xiàn)/藥理學(xué)：藥物對TBARS的影響。

試劑盒組成：

-TBA試劑：25mL

-標(biāo)準品：50?L，6MMDA

-10%三氯乙酸（TCA）：25mL

儲存條件：

試劑盒在室溫下運輸。將所有組分儲存于-20°C。自收貨之日起有效期為六個月。

注意事項：

試劑僅供研究使用。使用試劑時應(yīng)遵循實驗室試劑的常規(guī)預(yù)防措施。詳細信息請參閱材料安全數(shù)據(jù)表。

樣本準備：

如果樣本不能立即檢測，可在-80°C下冷凍保存（穩(wěn)定一個月）。尿液樣本在25°C或更低溫度下至少可穩(wěn)定保存3天。尿液和唾液樣本可直接檢測（n=1）。以下樣本在檢測前需要脫蛋白：

1.對于血清和血漿，將每個樣本的100?L轉(zhuǎn)移至標(biāo)記的1.5-mL離心管中。對于組織樣本，稱取約20mg組織放入200?L冰冷的磷酸鹽緩沖液（PBS）中。在冰上進行短暫超聲處理（例如20秒）以勻漿組織。如果需要，可取出20?L用于蛋白質(zhì)分析。將100?L組織裂解液放入標(biāo)記的1.5mL微量離心管中。對于細胞樣本，用200?L冰冷的PBS收集5×10?個細胞，并超聲處理以破壞細胞。如果需要，可取出20?L用于蛋白質(zhì)分析。將100?L細胞裂解液放入標(biāo)記的1.5mL微量離心管中。

2.向每個100?L樣本中加入200?L冰冷的10%TCA。在冰上孵育5分鐘。

3.在Eppendorf離心機中以14,000rpm離心5分鐘。將每個上清液的200?L轉(zhuǎn)移至新的標(biāo)記管中。這些預(yù)處理樣本的稀釋因子為n=3。

熒光法檢測步驟：

熒光法檢測比比色法靈敏20倍。

1.按比色法檢測步驟準備標(biāo)準品。將每個標(biāo)準品的10?L轉(zhuǎn)移至標(biāo)記的試管中。加入190?L去離子水（最終濃度分別為0、0.45、0.90、1.50?MMDA）。

樣本：在單獨的試管中加入200?L處理后的樣本。

2.加入200?LTBA試劑。渦旋混合后在100°C下孵育60分鐘。將試管冷卻至室溫，渦旋并短暫離心。

3.將每個試管中的100?L分別以雙份形式加入黑色平底96孔板的孔中。在酶標(biāo)儀上讀取熒光強度（λex/em=530nm/550nm）。

所需材料（但未提供）：

-移液裝置、離心管、離心機、透明平底未涂層96孔板、光學(xué)密度或熒光酶標(biāo)儀、超聲儀、水浴或加熱塊。

文獻參考：

1. Paul, S., et al. (2021). D4F prophylaxis enables redox and energy homeostasis while preventing inflammation during hypoxia exposure.Biomedicine & Pharmacotherapy. 133: 111083.

2. Liang, K., et al. (2020). Effect of storage on n-3 PUFA-enriched eggs.CyTA - Journal of Food. 18(1): 102-107.

3. Nawab, A., et al. (2019). Effect of dietary curcumin on the antioxidant status of laying hens under high- temperature condition. Journal of Thermal Biology. 86: 102449.

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。