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過氧化氫酶(Catalase,EC1.11.1.6)是一種廣泛存在的抗氧化酶,能夠催化過氧化氫(H2O2)分解為水和氧氣。通過防止過氧化氫的過度積累,過氧化氫酶使得產(chǎn)生H?O?作為副產(chǎn)物的重要細胞過程能夠安全進行。過氧化氫酶活性的缺乏與灰發(fā)和過氧化物酶體疾病無過氧化氫酶癥(acatalasia)有關。用于測定過氧化氫酶活性的簡單、直接且高通量的檢測方法具有廣泛的應用。BioAssaySystems改進的檢測方法直接測量過氧化氫酶對H2O2的降解,使用一種氧化還原染料。在570nm處的吸光強度變化或熒光強度變化(λem/ex=585/530nm)與樣本中的過氧化氫酶活性成正比。
作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理,艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品【干冰】EnzyChrom 過氧化氫酶檢測試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 詳情 |
【干冰】EnzyChrom 過氧化氫酶檢測試劑盒 | BAS-ECAT-100 | 查看 |
主要特點
-靈敏且準確。使用10uL樣本。線性檢測范圍:比色法為0.2-5U/L,熒光法為0.02-0.5U/L。
-簡單便捷。操作過程包括向樣本中加入底物,孵育30分鐘,隨后加入檢測試劑并讀取吸光度或熒光強度。
應用
-直接檢測:適用于生物樣本(如血清、血漿、尿液、唾液、細胞培養(yǎng)等)中的過氧化氫酶活性。
-藥物發(fā)現(xiàn)/藥理學:研究藥物對過氧化氫酶活性的影響。
試劑盒組成
-檢測緩沖液:25mL
-HRP酶:120uL
-染料試劑:120uL
-H2O2溶液:100uL(3%H2O2)
-陽性對照:8uL過氧化氫酶
儲存條件
試劑盒在運輸過程中使用冰塊冷藏。收到后,所有組分應儲存于-20°C。有效期為6個月。
注意事項
-試劑僅供研究使用。在使用試劑時,應遵循實驗室試劑的常規(guī)安全措施。請參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細信息。
樣本準備
-組織(10mg)和細胞(10?)在200uL冰冷的PBS中勻漿。以14000rpm離心10分鐘以去除雜質(zhì)。使用上清液進行檢測。
-注意:含有巰基(-SH)的試劑(例如β-巰基乙醇、二硫蘇糖醇)已知會干擾此檢測,應在樣本中保持低于10uM的濃度。
計算
-從標準值中減去空白值(#4),并繪制?OD(吸光度差)或?F(熒光強度差)與標準濃度的關系圖。確定斜率,并計算樣本的過氧化氫酶活性。
-RSAMPLEBlank和RSAMPLE分別是樣本空白和樣本的吸光度或熒光強度讀數(shù)。斜率從標準曲線中確定。30分鐘是過氧化氫酶反應時間。n是樣本的稀釋倍數(shù)。
-單位定義:1個單位是指在pH7.0和室溫下,每分鐘分解1微摩爾H2O2的過氧化氫酶的量。

文獻參考:
1. Pradhan, Arnab, et al (2017). Elevated catalase expression in a fungal pathogen is a double-edged sword of iron. PLoS pathogens
13.5: e1006405.
2. AlAsmari, A. F.,et al (2020). Elucidation of the molecular mechanisms underlying sorafenib-induced Hepatotoxicity. Oxidative
Medicine and Cellular Longevity, 2020, 1-10
3. Sahin, T. D., et al. (2020). Infliximab prevents dysfunction of the vas deferens by suppressing inflammation and oxidative stress in rats with chronic stress. Life Sciences, 250, 117545.
BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術生物技術公司,專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測試劑盒,產(chǎn)品種類齊全,主要用于科學研究和生物醫(yī)藥開發(fā),以滿足生命科學行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗,已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學研究的檢測試劑盒。產(chǎn)品主要包括:1.血液尿液化學;2.酶活性測定;3.能量代謝;4.氧化應激;5.高通量HTS試劑;6.陰陽離子檢測。
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