透明質(zhì)酸酶是一類能夠催化糖胺聚糖透明質(zhì)酸降解的酶。透明質(zhì)酸是生物體細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分之一，它在細(xì)胞增殖和遷移中發(fā)揮重要作用。透明質(zhì)酸酶在分解細(xì)胞增殖的關(guān)鍵因素——透明質(zhì)酸中的作用，使其成為癌癥治療的潛在靶點(diǎn)。一種假設(shè)是，增加透明質(zhì)酸酶的活性可能通過(guò)分解腫瘤擴(kuò)張所需的細(xì)胞外基質(zhì)來(lái)阻止腫瘤侵襲。相反，降低透明質(zhì)酸酶活性可能通過(guò)阻止癌細(xì)胞從原發(fā)腫瘤中逃逸來(lái)防止轉(zhuǎn)移。關(guān)于透明質(zhì)酸酶在癌癥病理學(xué)中確切作用的研究仍在進(jìn)行中。

BioAssay Systems的透明質(zhì)酸酶抑制劑篩選試劑盒采用兩步比濁法反應(yīng)，通過(guò)測(cè)量被水解的透明質(zhì)酸的量來(lái)測(cè)定透明質(zhì)酸酶的活性。一種終止試劑會(huì)停止酶促反應(yīng)，并與孔中殘留的透明質(zhì)酸形成濁度。在600 nm處的濁度降低與樣本中的透明質(zhì)酸酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品透明質(zhì)酸酶抑制劑篩選試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)

- 快速可靠。整個(gè)檢測(cè)可在30分鐘內(nèi)完成。

- 簡(jiǎn)單便捷。操作簡(jiǎn)單，僅涉及酶促反應(yīng)和終止試劑的加入，無(wú)需洗滌或試劑轉(zhuǎn)移步驟。

- 穩(wěn)健且適用于高通量篩選。可在高通量篩選液體處理系統(tǒng)上輕松自動(dòng)化，每天可處理數(shù)千個(gè)樣本。

應(yīng)用

- 高通量篩選用于評(píng)估透明質(zhì)酸酶抑制劑。

試劑盒組成（96孔板100次檢測(cè)）

- 底物：1.5 mL

- 終止試劑：20 mL

- 檢測(cè)緩沖液：5 mL

- 酶緩沖液：5 mL

儲(chǔ)存條件

試劑盒在室溫下運(yùn)輸。收貨后將試劑盒組件儲(chǔ)存于-20°C。保質(zhì)期：收貨后12個(gè)月。

注意事項(xiàng)

試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)注意事項(xiàng)。請(qǐng)參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

酶活性檢測(cè)操作步驟

該檢測(cè)基于酶催化的動(dòng)力學(xué)反應(yīng)。為確保相同的孵育時(shí)間，加入工作試劑的速度應(yīng)快，混合應(yīng)簡(jiǎn)短但充分。建議使用多通道移液器。注意：試劑盒中未包含透明質(zhì)酸酶或?qū)φ找种苿?/p>

試劑準(zhǔn)備：檢測(cè)前，將所有組件平衡至室溫。工作試劑應(yīng)新鮮配制，并在兩小時(shí)內(nèi)使用。

酶準(zhǔn)備：透明質(zhì)酸酶應(yīng)在酶緩沖液中配制，并新鮮使用。白蛋白和其他蛋白質(zhì)會(huì)干擾此檢測(cè)，不應(yīng)包含在酶緩沖液中。

以下協(xié)議針對(duì)人透明質(zhì)酸酶（Acro Biosystems貨號(hào)PH0-H5225）或牛透明質(zhì)酸酶（Calzyme貨號(hào)091A0300）進(jìn)行了優(yōu)化。如果使用不同物種或品牌的酶，我們建議您通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定每孔使用的最佳酶量（請(qǐng)參閱網(wǎng)站上的產(chǎn)品常見(jiàn)問(wèn)題解答以獲取指導(dǎo)）。

將人透明質(zhì)酸酶在酶緩沖液中稀釋至20 U/mL。如果使用牛透明質(zhì)酸酶，則在酶緩沖液中稀釋至10 U/mL。

測(cè)試化合物準(zhǔn)備：將測(cè)試化合物（即抑制劑）溶解在所選溶劑中。首先測(cè)試所選酶對(duì)溶劑的耐受性是明智的。在100 ?L酶促反應(yīng)中，二甲基亞砜（DMSO）濃度為1%（體積比）或更低時(shí)不會(huì)干擾反應(yīng)（20 ?L測(cè)試化合物可在5% DMSO中）。

所需材料（但未提供）

- 純化的人透明質(zhì)酸酶（例如Acro Biosystems貨號(hào)PH0-H5225）或牛透明質(zhì)酸酶（例如Calzyme貨號(hào)091A0300），以及如果需要的話，一種對(duì)照透明質(zhì)酸酶抑制劑（例如6-O-棕櫚酰-L-抗壞血酸，TCI貨號(hào)A0540）、移液裝置、Eppendorf管、透明平底96孔板和板式讀數(shù)儀。

示例：

6-O-棕櫚酰-L-抗壞血酸滴定：重組人HAase與不同濃度的6-O-棕櫚酰-L-抗壞血酸一起孵育酸。每種濃度的抑制劑均含有5v%的DMSO（最終1v%100uL酶反應(yīng)）。

文獻(xiàn)：

1. Lokeshwar, B., et al (2005). HYAL1 Hyaluronidase in Prostate Cancer:A Tumor Promoter and Suppressor. Cancer Res 65(17):7782-7789.

2. Girish, K., et al (2009). Hyaluronidase Inhibitors: A Biological and Therapeutic Perspective. Curr. Med. Chem. 16(18):2261-2288.

3. Whatcott, C., et al (2011). Targeting the Tumor Microenvironment in Cancer: Why Hyaluronidase Deserves a Second Look. Cancer Discovery. 1(4):291-96.

4. Whatcott, C., et al (2016). Hyaluronidase To Enhance NanoparticleBased Photodynamic Tumor Therapy. Nano Lett. 16(4):2512-2521.

BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開(kāi)發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過(guò)50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開(kāi)發(fā)了超過(guò)250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽(yáng)離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。