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尿素酶(酰胺水解酶,EC 3.5.1.5)是一種能夠催化尿素水解為二氧化碳和氨的酶。
化學(xué)反應(yīng)式為:
(NH?)?CO + H?O → CO? + 2NH?
許多胃腸道或泌尿道病原體會(huì)產(chǎn)生尿素酶。因此,其活性是檢測(cè)如幽門螺桿菌等病原體存在與否的有用診斷參數(shù)。尿素酶存在于細(xì)菌、酵母和高等植物中。在牛瘤胃厭氧菌、人類糞便以及環(huán)境樣本(如土壤和浮游植物)中,通常會(huì)測(cè)定尿素酶活性。
BioAssay Systems的尿素酶測(cè)定試劑盒提供了一種非常靈敏且便捷的手段,用于測(cè)定包括土壤在內(nèi)的多種樣本中的尿素酶活性。在該測(cè)定中,尿素酶與尿素發(fā)生反應(yīng),生成氨,氨的含量通過在670納米處的伯特洛特法(Berthelot method)進(jìn)行測(cè)定。該測(cè)定方法簡(jiǎn)單、靈敏、穩(wěn)定,并且可以適應(yīng)高通量檢測(cè)。
作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理,艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品脲酶測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
| 產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 詳情 |
脲酶測(cè)定試劑盒 | BAS-DURE-100 | 查看 |
脲酶測(cè)定試劑盒:
主要特點(diǎn):
- 安全。非放射性測(cè)定法。
- 靈敏且準(zhǔn)確。能夠定量檢測(cè)低至0.003 U/L的尿素酶活性。
- 均質(zhì)且便捷。“混合-孵育-測(cè)量”型測(cè)定法。無需洗滌和試劑轉(zhuǎn)移步驟。
- 穩(wěn)健且適用于高通量篩選(HTS):可以輕松在高通量篩選液體處理系統(tǒng)上自動(dòng)化操作,每天可處理數(shù)千個(gè)樣本。
應(yīng)用范圍:
- 生物和環(huán)境樣本中尿素酶活性的測(cè)定。
- 尿素酶抑制劑的評(píng)估和篩選。
試劑盒組成:
- 測(cè)定緩沖液:20毫升(pH 7.0)
- 試劑A:12毫升
- 尿素:1.5毫升
- 試劑B:6毫升
- 氯化銨:100微升(50毫摩爾/升)
儲(chǔ)存條件:
- 試劑盒在室溫下運(yùn)輸。收到后將所有試劑儲(chǔ)存于4攝氏度。有效期為收到后6個(gè)月。
注意事項(xiàng):
- 試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)預(yù)防措施。請(qǐng)參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。
一般注意事項(xiàng):
1. 土壤和其他環(huán)境樣本可以用測(cè)定緩沖液(10毫摩爾/升磷酸鈉,pH 7.0)通過任何既定方法進(jìn)行提取。對(duì)于這類低尿素酶活性樣本,尿素酶反應(yīng)孵育時(shí)間為2到4小時(shí),溫度為30攝氏度或37攝氏度(步驟2)。
土壤樣本可能含有極低濃度的氨。為了校正樣本中的氨,在檢測(cè)前(步驟3),按照以下順序混合制備樣本空白:100微升試劑A、90微升樣本提取液、10微升尿素和50微升試劑B。
2. 比色皿測(cè)定:將反應(yīng)體系擴(kuò)大4倍,總體積為1毫升,使用360微升樣本、40微升尿素、400微升試劑A和200微升試劑B。
所需材料(但未提供):
- 移液裝置、離心管、透明平底96孔板(例如Corning Costar)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:

0.5克土壤樣本在10毫升10毫摩爾/升磷酸鈉(pH 7.0)中均質(zhì)化(50克土壤/升)。通過14,000g離心5分鐘獲得含有尿素酶的澄清上清液。按照協(xié)議進(jìn)行酶反應(yīng),孵育4小時(shí),溫度為30攝氏度。
反應(yīng)結(jié)束后,測(cè)得銨濃度為29.4微摩爾/升,相當(dāng)于尿素酶活性為29.4微摩爾/升÷240分鐘=0.123 U/L,或29.4微摩爾/升÷(50克/升×4小時(shí))=0.15微摩爾/克·小時(shí)。
文獻(xiàn)參考:
1. Liu, Q. W. et al. (2018). Therapeutic efficiency of human amniotic epithelial stem cell-derived functional hepatocyte-like cells in mice with acute hepatic failure. Stem cell research & therapy, 9(1), 321.
2. Wu, D (2015). Constitutive expression of the DUR1, 2 gene in an industrial yeast strain to minimize ethyl carbamate production during Chinese rice wine fermentation. FEMS Microbiology Letters 363(1):fnv214.
3. Zhang, T. et al (2015). Development of an Agrobacterium-mediated transformation system for the cold-adapted fungi Pseudogymnoascus destructans and P. pannorum. Fungal Genetics and Biology 81: 73-81.
BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司,專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒,產(chǎn)品種類齊全,主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā),以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗(yàn),已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括:1.血液尿液化學(xué);2.酶活性測(cè)定;3.能量代謝;4.氧化應(yīng)激;5.高通量HTS試劑;6.陰陽(yáng)離子檢測(cè)。
作為BioAssay Systems在中國(guó)區(qū)域的代理,艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。
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