阿魏酸酶（阿魏酸水合酶） 是三羧酸（TCA）循環(huán)中的一種酶，能夠催化檸檬酸轉(zhuǎn)化為異檸檬酸。阿魏酸酶的活性在很大程度上依賴于鐵硫 [Fe4S4]2+ 簇。  

相關(guān)疾病包括阿魏酸酶缺乏癥（例如肌病和運(yùn)動(dòng)不耐受）、弗里德賴希共濟(jì)失調(diào)癥和糖尿病。  

BioAssay Systems 的阿魏酸酶檢測試劑盒通過測量阿魏酸酶反應(yīng)生成的異檸檬酸來檢測阿魏酸酶活性。異檸檬酸隨后被氧化，產(chǎn)生 NADPH 和氧化產(chǎn)物。NADPH 將染料轉(zhuǎn)化為一種在 565 nm 處有最大吸收峰的深紫色。在 565 nm 處的吸光度增加與阿魏酸酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品【干冰】EnzyChrom烏頭酶檢測試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)：

快速且靈敏。線性檢測范圍（20 uL 樣本）：20 分鐘反應(yīng)時(shí)為 0.5 至 100 U/L。  

方便且高通量。均質(zhì)“混合 - 孵育 - 測量”型檢測。可在高通量篩選液體處理系統(tǒng)上自動(dòng)化操作，每天可處理數(shù)千個(gè)樣本。

應(yīng)用：

用于生物樣本（例如細(xì)胞裂解液、組織勻漿、血清等）中阿魏酸酶活性的測定。

試劑盒組成（96 孔板，100 次檢測）

檢測緩沖液：10 mL  

酶 A：120 uL  

NADP/MTT：1 mL  

酶 B：120 uL  

標(biāo)準(zhǔn)品：1 mL  

底物：1 mL  

儲(chǔ)存條件：

試劑盒在運(yùn)輸過程中使用冰袋。收到后請將所有組分儲(chǔ)存于 -20°C。保質(zhì)期：收到后 6 個(gè)月。  

注意事項(xiàng)：試劑僅用于研究。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)預(yù)防措施。請參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

樣本準(zhǔn)備：

組織：解剖前，用磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）沖洗組織以去除血液。將組織（50 mg）在約 200 uL 冷 PBS 中勻漿。在 4°C 下以 800 x g 離心 10 分鐘。取出上清液用于線粒體制備。  

細(xì)胞裂解液：通過在 4°C 下以 2,000 x g 離心 5 分鐘收集細(xì)胞。對于貼壁細(xì)胞，不要使用蛋白酶酶收獲細(xì)胞；而是使用橡膠刮刀。在適當(dāng)體積的冷 PBS 中勻漿或超聲處理細(xì)胞。在 4°C 下以 800 x g 離心 10 分鐘。取出上清液用于線粒體制備。  

線粒體制備：將取出的上清液在 4°C 下以 20,000 x g 離心 10 分鐘。去除上清液，將沉淀重懸于冷 PBS 中并超聲處理 20 秒。樣本可在 -80°C 下保存至少一個(gè)月。

文獻(xiàn)參考：

1. Kennedy, MC et al. (1963) The Role of Iron in the ActivationInactivation of Aconitase. J Biol Chem. 258(18):11098-105

2. Kennedy, MC et al. (1992) Purification and characterization of cytosolic aconitase from beef liver and its relationship to the iron responsive element binding protein. Proc Natl Acad Sci USA. 89(24):11730-34

3. Villafranca, JJ et al. (1974) The Mechanism of Aconitase Action. J Biol Chem. 249(19):6149-55.

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

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