絲裂原活化蛋白激酶（MAPK/ERK）通路在細(xì)胞增殖、分化和遷移中起著關(guān)鍵作用。絲裂原的刺激最終會(huì)導(dǎo)致ERK1（T202/Y204）和ERK2（T185/Y187）的磷酸化。MAPK/ERK級(jí)聯(lián)反應(yīng)為癌癥治療藥物的開發(fā)提供了許多有趣的靶點(diǎn)。

BioAssaySystems的基于細(xì)胞的ELISA檢測(cè)方法可以直接在完整細(xì)胞中測(cè)量雙重磷酸化的ERK1/2，并將信號(hào)與細(xì)胞總蛋白含量進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。這種簡(jiǎn)單高效的檢測(cè)方法省去了細(xì)胞裂解液制備的步驟，可用于研究激酶信號(hào)傳導(dǎo)以及激酶抑制劑對(duì)細(xì)胞的影響。在此檢測(cè)中，細(xì)胞在96孔板中培養(yǎng)，并用配體或藥物處理。隨后，細(xì)胞在孔中固定并透化。通過熒光ELISA檢測(cè)ERK1/2的磷酸化（pERK），然后測(cè)量每個(gè)孔中的總蛋白含量。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品【干冰】EnzyFluo ERK磷酸化測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)

-全新升級(jí)。檢測(cè)總時(shí)間從標(biāo)準(zhǔn)的21小時(shí)縮短至6.5小時(shí)（實(shí)際操作時(shí)間為2.5小時(shí)）。

-簡(jiǎn)單便捷。細(xì)胞直接在96孔板中培養(yǎng)，無需細(xì)胞裂解。

-準(zhǔn)確且高通量。在同一孔中將蛋白磷酸化水平與細(xì)胞總蛋白進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，極大地減少了孔間差異。可輕松自動(dòng)化為高通量96孔板檢測(cè)，每天可處理數(shù)千個(gè)樣本。

應(yīng)用

-用于培養(yǎng)細(xì)胞中ERK1/2磷酸化狀態(tài)的定量熒光免疫酶聯(lián)檢測(cè)。

-評(píng)估配體或藥物對(duì)ERK磷酸化的影響。

-已測(cè)試物種：人、小鼠、大鼠。

試劑盒組成

-洗滌緩沖液原液：25mL

-封閉緩沖液：25mL

-蛋白染色液：6mL

-染料試劑：120uL

-Ab1抗體：10uL

-Ab2（gM-HRP）抗體：10uL

儲(chǔ)存條件：將所有試劑儲(chǔ)存于-20°C。有效期為自收貨之日起6個(gè)月。

注意事項(xiàng)：試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)需遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)注意事項(xiàng)。請(qǐng)參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果示例

-左圖：PANC-1細(xì)胞經(jīng)佛波醇酯（PMA）處理后ERK1/2磷酸化的動(dòng)力學(xué)曲線。

-右圖：激酶抑制劑索拉非尼對(duì)ERK1/2磷酸化的抑制作用。細(xì)胞先用藥物處理3小時(shí)，然后用PMA處理5分鐘。RBL-2H3、NIH3T3和PANC-1細(xì)胞系的IC??值分別為2.1uM、11.4uM和11.5uM。

文獻(xiàn)參考：

1. Cobb MH, et al (1994). The mitogen-activated protein kinases, ERK1 and ERK2. Semin Cancer Biol. 5(4):261-268.

2. Daniluk J, Dabrowski A. (2007). The effect of concomitant stimulation with cholecystokinin and epidermal growth factor on extracellular signalregulated kinase (ERK) activity in pancreatic acinar cells. J Physiol Pharmacol. 58(3):441-53.

3. Iqbal J, et al (2007). Rapid in vivo effects of estradiol-17beta in ovine pituitary gonadotropes are displayed by phosphorylation of extracellularly regulated kinase, serine/threonine kinase, and 3',5'-cyclic adenosine 5'-monophosphate-responsive element-binding protein. Endocrinology 148 (12): 5794-802. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。