核因子κB（NFκB）是一種在許多生理過程中發(fā)揮核心作用的轉(zhuǎn)錄因子，例如炎癥、腫瘤發(fā)生和細(xì)胞凋亡。 NFκB可被多種刺激激活，包括促炎細(xì)胞因子如腫瘤壞死因子α（TNF-α）。NFκB是由Rel蛋白家族成員組成的二聚體，包括p65/RelA、c-Rel、RelB、NFκB1/p50和NFκB2/p52。p65/RelA在Ser-536位點(diǎn)的磷酸化導(dǎo)致其核輸出減少，并增強(qiáng)p65/RelA依賴的轉(zhuǎn)錄。

BioAssay Systems的基于細(xì)胞的ELISA檢測(cè)方法可測(cè)量完整細(xì)胞中的磷酸化p65（S536）（pNFκB），并將信號(hào)與總蛋白含量進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。 這種簡(jiǎn)單高效的檢測(cè)方法無需細(xì)胞裂解液制備，可用于短期和長(zhǎng)期檢測(cè)中NFκB調(diào)控的研究。

作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品EnzyFluo NFkB磷酸化測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)

全新改進(jìn)。將標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)時(shí)間從21小時(shí)縮短至6.5小時(shí)（實(shí)際操作時(shí)間為2.5小時(shí)）。

簡(jiǎn)單方便。細(xì)胞可直接在96孔板中培養(yǎng)，無需細(xì)胞裂解。

準(zhǔn)確且適用于高通量檢測(cè)。在同一孔中將蛋白磷酸化與總細(xì)胞蛋白進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，極大地減少了孔間差異。可輕松自動(dòng)化為高通量96孔板檢測(cè)，每天可處理數(shù)千個(gè)樣品。

應(yīng)用

測(cè)定完整細(xì)胞中NFκB p65（S536）的磷酸化狀態(tài)。

評(píng)估對(duì)NFκB p65磷酸化的直接和間接調(diào)節(jié)。

已測(cè)試物種：人、小鼠。

試劑盒組成

洗滌緩沖液原液：25毫升

封閉緩沖液：25毫升

蛋白染色液：6毫升

染料試劑：120微升

Ab1：10微升

Ab2（gR-HRP）：10微升

儲(chǔ)存條件

本試劑盒在運(yùn)輸過程中使用冰塊包裝。收到后，將所有試劑儲(chǔ)存于-20攝氏度。保質(zhì)期：收到后6個(gè)月。

注意事項(xiàng)

試劑僅用于研究。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的一般安全措施。詳細(xì)信息請(qǐng)參閱材料安全數(shù)據(jù)表。

左圖：人乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231和小鼠NIH-3T3成纖維細(xì)胞在人TNF-α刺激后NFκB p65（S536）的磷酸化情況。

右圖：MDA-MB-231細(xì)胞在TNF-α刺激后NFκB p65（S536）磷酸化的動(dòng)力學(xué)。

文獻(xiàn)參考：

1. Neumann M and Naumann M (2007). Beyond IkappaBs: alternative regulation of NF-kappaB activity. FASEB J. 21(11):2642-54

2. Jiang X et al (2003). The NF-kappa B activation in lymphotoxin beta receptor signaling depends on the phosphorylation of p65 at serine 536.J Biol Chem. 278(2):919-26.

3. Gutierrez H et al (2008). Nuclear factor kappa B signaling either stimulates or inhibits neurite growth depending on the phosphorylation status of p65/RelA. J Neurosci. 28(33):8246-56. 

BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。