磷脂酶D（PLD）催化甘油磷脂的磷酸二酯鍵的水解，生成磷脂酸和一個(gè)自由頭基團(tuán)。PLD表達(dá)的異常與人類癌癥有關(guān)。BioAssay Systems的方法提供了一種簡(jiǎn)單且高通量的檢測(cè)方法，用于測(cè)量PLD活性。在此檢測(cè)中，PLD水解磷脂酰膽堿生成膽堿，隨后利用膽堿氧化酶和一種特異性過(guò)氧化氫酶染料進(jìn)行測(cè)定。在570納米處的粉紅色產(chǎn)物的光密度或熒光強(qiáng)度（530/585納米）與樣本中的PLD活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品EnzyChrom 磷脂酶d測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)

靈敏：使用10微升樣本。檢測(cè)范圍：比色法檢測(cè)為0.06至10 U/L，熒光法檢測(cè)為0.04至1 U/L。

簡(jiǎn)單且高通量：檢測(cè)過(guò)程只需加入單一工作試劑，可輕松適應(yīng)高通量檢測(cè)，用于藥物篩選。

應(yīng)用

直接檢測(cè)：用于生物樣本中的磷脂酶D檢測(cè)。

藥物發(fā)現(xiàn)/藥理學(xué)：研究藥物對(duì)磷脂酶D代謝的影響。

試劑盒組成

檢測(cè)緩沖液：10毫升

染料試劑：120微升

酶混合物：干粉

底物：1.5毫升

校準(zhǔn)液：400微升

儲(chǔ)存條件

試劑盒在運(yùn)輸過(guò)程中使用冰塊包裝。收到后，所有組分應(yīng)儲(chǔ)存在-20℃。保質(zhì)期為收到后六個(gè)月。

注意事項(xiàng)

試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)預(yù)防措施。請(qǐng)參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

比色法檢測(cè)

液體樣本可以直接檢測(cè)。固體樣本應(yīng)在檢測(cè)前在合適的酶緩沖液中勻漿。

注意：含有巰基的試劑（例如β-巰基乙醇、二硫蘇糖醇，濃度>5微摩爾）、疊氮化鈉、EDTA和十二烷基硫酸鈉已知會(huì)干擾此檢測(cè)，應(yīng)在樣本制備中避免使用。如果樣本已知含有膽堿，應(yīng)通過(guò)透析或膜過(guò)濾將其去除。

所需材料（但未提供）

移液裝置、離心管、透明平底未涂層96孔板、光密度板讀取器；黑色平底未涂層96孔板、熒光板讀取器。

文獻(xiàn)參考：

1. Su W, Chen Q, Frohman MA. (2009). Targeting phospholipase D with small-molecule inhibitors as a potential therapeutic approach for cancer metastasis. Future Oncol. 5(9):1477-86.

2. Carman GM, Fischl AS, Dougherty M, Maerker G. (1981). A spectrophotometric method for the assay of phospholipase D activity. Anal Biochem. 110(1):73-6.

3. Imamura S, Horiuti Y. (1978). Enzymatic determination of phospholipase D activity with choline oxidase. J Biochem. 83(3):677-80. 

BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開(kāi)發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過(guò)50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開(kāi)發(fā)了超過(guò)250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽(yáng)離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。