丙酮酸是細(xì)胞代謝途徑中的關(guān)鍵中間體。丙酮酸可以通過(guò)糖異生轉(zhuǎn)化為碳水化合物，通過(guò)乙酰輔酶A轉(zhuǎn)化為脂肪酸或產(chǎn)生能量，還可以轉(zhuǎn)化為氨基酸丙氨酸和乙醇。丙酮酸水平異常與肝臟疾病和代謝紊亂有關(guān)。簡(jiǎn)單、直接且適合自動(dòng)化的丙酮酸濃度檢測(cè)方法在研究和藥物發(fā)現(xiàn)中應(yīng)用廣泛。BioAssay Systems的丙酮酸檢測(cè)使用單一工作試劑，將丙酮酸氧化酶和過(guò)氧化氫檢測(cè)結(jié)合在一個(gè)步驟中完成。反應(yīng)產(chǎn)物在570納米處的吸光度或在激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)為530/585納米處的熒光強(qiáng)度與樣本中的丙酮酸濃度成正比。

作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品EnzyChrom 丙酮酸測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)

靈敏且準(zhǔn)確：使用10微升樣本。96孔板的線性檢測(cè)范圍為2至500微摩爾/升（17微克/分升至4.4毫克/分升）丙酮酸（比色法檢測(cè)）和0.2至50微摩爾/升（熒光法檢測(cè)）。

簡(jiǎn)單且便捷：操作過(guò)程只需加入單一工作試劑，在室溫下孵育30分鐘，適用于高通量篩選（HTS）檢測(cè)。

改進(jìn)的試劑穩(wěn)定性：優(yōu)化的配方顯著增強(qiáng)了試劑和信號(hào)的穩(wěn)定性。

應(yīng)用

直接檢測(cè)：用于生物樣本中的丙酮酸檢測(cè)。

藥物發(fā)現(xiàn)/藥理學(xué)：研究藥物對(duì)丙酮酸代謝的影響。

試劑盒組成

酶混合物：10毫升

染料試劑：120微升

標(biāo)準(zhǔn)品：400微升（25毫摩爾/升丙酮酸）

儲(chǔ)存條件

試劑盒在運(yùn)輸過(guò)程中使用干冰包裝。收到后，所有試劑應(yīng)儲(chǔ)存在-20℃。保質(zhì)期為收到后六個(gè)月。

注意事項(xiàng)

試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)預(yù)防措施。請(qǐng)參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

比色法操作步驟

注意：含有巰基的試劑（例如巰基乙醇、DTT）可能會(huì)干擾此檢測(cè)，應(yīng)在樣本制備中避免使用。

1. 平衡溫度：將所有組分平衡至室溫。通過(guò)將10微升25毫摩爾/升標(biāo)準(zhǔn)品與490微升水混合，制備500微摩爾/升標(biāo)準(zhǔn)品預(yù)混液。

2. 工作試劑制備：對(duì)于每個(gè)反應(yīng)孔，在一個(gè)干凈的試管中混合94微升酶混合物和1微升染料試劑。將90微升工作試劑轉(zhuǎn)移到每個(gè)檢測(cè)孔中。輕拍平板以混合。將未使用的試劑冷凍保存以備后續(xù)使用。

3. 孵育和讀數(shù)：在室溫下孵育30分鐘。在570納米（550-585納米）處讀取光密度。

文獻(xiàn)參考：

1. Lopez-Cano, C et al (2020). Effect of type 2 diabetes mellitus on the hypoxia-inducible factor 1-alpha expression. Is there a relationship with the clock genes? Journal of Clinical Medicine, 9(8).

2. Chao, CC et al (2019). Metabolic control of astrocyte pathogenic activity via cpla2-mavs. Cell, 179(7), 1483-1498.e22.

3. Schoenrogge, M., Kerndl, H., Zhang, X., Kumstel, S., Vollmar, B.,& Zechner, D. (2018). alpha-cyano-4-hydroxycinnamate impairs pancreatic cancer cells by stimulating the p38 signaling pathway.Cellular signalling, 47, 101-108. 

BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開(kāi)發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過(guò)50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開(kāi)發(fā)了超過(guò)250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽(yáng)離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。