尿酸酶（Uricase）或黃嘌呤氧化酶（Urate Oxidase，E.C. 1.7.3.3）

尿酸酶啟動了尿酸的氧化過程，最終生成尿囊素。尿酸酶的活性存在于植物、動物和細菌中，但在類人猿中并不存在。因此，當尿酸水平過高時，人類就會患上痛風。BioAssay Systems的方法提供了一種簡單且高通量的測定尿酸酶活性的實驗方法。在此實驗中，尿酸通過酶促反應轉化為尿囊素，同時釋放出過氧化氫（H2O2）。生成的過氧化氫與特定的染料發(fā)生反應，形成粉紅色產物。在530/585納米處熒光強度的變化與樣本中的尿酸酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品EnzyFluo 尿素酶測定試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點

靈敏度高。使用10微升樣本。線性檢測范圍：熒光法測定尿酸酶活性為0.3 - 100 U/L。

快速。運行時間為10分鐘，可快速得出結果。

方便。常溫“混合即讀”程序可輕松自動化，每天可高通量測定數(shù)千個樣本。

應用

測定：用于測定生物樣本（如細胞培養(yǎng)、非人類生物液體、細胞提取物和植物組織提取物）中的尿酸酶活性。

試劑盒組成

測定緩沖液：5毫升

染料試劑：120微升

底物：5毫升 1 mM尿酸

HRP酶：120微升

尿酸酶對照：20微升

標準品：100微升 3% H?O?

儲存條件

試劑盒在冰上運輸。將所有組分儲存于-20°C。保質期為收到后六個月。

注意事項

試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規(guī)預防措施。請參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細信息。

熒光法測定

液體樣本（如血清和血漿）可直接進行測定。組織和細胞裂解液需要澄清且無雜質。

注意：含巰基（-SH）的試劑（例如β-巰基乙醇、二硫蘇糖醇，> 5微摩爾）、疊氮化鈉、EDTA和十二烷基硫酸鈉已知會干擾此實驗，應在樣本準備中避免使用。

將所有組分平衡至室溫。打開前短暫離心試管。在實驗過程中將解凍的試管置于冰上。

H?O?標準曲線。將10微升3% H?O?與870微升去離子水混合（最終濃度為10 mM），然后將10微升10 mM H?O?與990微升去離子水混合，得到100微摩爾H?O?。

熒光反應。通過混合以下試劑為每個孔準備足夠量的工作試劑：50微升測定緩沖液、50微升1 mM尿酸底物、1微升HRP酶和1微升染料試劑。向每個孔中加入90微升工作試劑。

在動力學模式下，以激發(fā)波長530納米和發(fā)射波長585納米讀取10分鐘的熒光強度。

圖表說明

左圖：96孔熒光法測定。100 U/L尿酸酶、60 U/L尿酸酶、大鼠肝微粒體、豌豆根。

右圖：大鼠肝臟細胞質（#1）、大鼠肝臟S9組分（#2）、大鼠肝微粒體（#3）、豌豆根（#4）和豌豆莖（#5）中尿酸酶的比活性。

文獻參考：

1. Kratzer JT et al (2014) Evolutionary history and metabolic insights of ancient mammalian uricases. Proc Natl Acad Sci USA 111(10):3763-8.

2. Maiuolo J et al (2016) Regulation of uric acid metabolism and excretion. Int J Cardiol. 213:8-14

3. Roman YM (2023) The role of uric acid in human health: Insights from the Uricase gene. J Pers Med. 13(9):1409

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術生物技術公司，專注于研發(fā)、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。