堿性磷酸酶（ALP）在堿性環(huán)境中催化磷酸酯的水解，生成有機(jī)自由基和無(wú)機(jī)磷酸鹽。在哺乳動(dòng)物中，這種酶主要存在于肝臟和骨骼中。血清中ALP水平顯著升高是一種被稱為高堿性磷酸酶血癥的疾病，它與惡性膽道阻塞、原發(fā)性膽汁性肝硬化、原發(fā)性硬化性膽管炎、肝淋巴瘤和結(jié)節(jié)病有關(guān)。

用于測(cè)定血清中ALP活性的簡(jiǎn)單、直接且易于自動(dòng)化的程序在研究和藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域越來(lái)越受歡迎。這種改進(jìn)的方法利用了4-甲基傘形酮磷酸鹽，它被ALP水解成具有高度熒光的產(chǎn)物4-甲基傘形酮。熒光增加的速率與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷(xiāo)產(chǎn)品堿性磷酸酶測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)

- 高靈敏度和寬線性范圍。使用10微升樣本。檢測(cè)限為0.02 U/L（20分鐘反應(yīng)）。

- 均質(zhì)且簡(jiǎn)單的操作流程。簡(jiǎn)單的“混合-測(cè)量”操作流程可在20分鐘內(nèi)可靠地定量ALP活性。

- 穩(wěn)定且適用于高通量篩選。所有試劑均與高通量液體處理儀器兼容。

應(yīng)用領(lǐng)域

- 直接測(cè)定：血清、血漿及其他來(lái)源中的ALP活性。

- ALP生產(chǎn)過(guò)程中的特性分析與質(zhì)量控制。

- 藥物發(fā)現(xiàn)：用于ALP調(diào)節(jié)劑的高通量篩選。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測(cè)）

- 試劑：14毫升（pH 10.5）

- 標(biāo)準(zhǔn)品：120微升

儲(chǔ)存條件

- 試劑盒在室溫下運(yùn)輸。收到后應(yīng)于-20°C保存。有效期為2年。

- 注意事項(xiàng)：試劑僅用于研究。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)注意事項(xiàng)。請(qǐng)參考材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

操作步驟

- 使用前將試劑解凍至室溫。本測(cè)定基于動(dòng)力學(xué)反應(yīng)。建議使用多通道移液器。向樣本中添加試劑應(yīng)迅速，混合應(yīng)簡(jiǎn)短但充分。測(cè)定可在室溫或37°C下進(jìn)行。

- 樣本準(zhǔn)備：ALP在4°C下可穩(wěn)定48小時(shí)，在-20°C下可穩(wěn)定2個(gè)月。EDTA、草酸鹽、氟化物、檸檬酸鹽是已知的ALP抑制劑，在樣本準(zhǔn)備過(guò)程中應(yīng)避免使用。血清、血漿（不含EDTA/檸檬酸鹽，最好無(wú)溶血）和細(xì)胞培養(yǎng)基可直接用于檢測(cè)。

所需材料（但未提供）

- 移液裝置及配件（例如多通道移液器）。

- 黑色平底96孔板（例如Corning Costar）和酶標(biāo)儀。

一般注意事項(xiàng)

1. 對(duì)于低ALP活性樣本（<1 U/L），建議延長(zhǎng)孵育時(shí)間，例如延長(zhǎng)至60分鐘。

2. 可根據(jù)需要將反應(yīng)體積縮小用于384孔測(cè)定，或放大用于比色皿測(cè)定。

示例：

標(biāo)準(zhǔn)曲線（孵育20分鐘）

文獻(xiàn)參考：

1. Domazetovic, V., et al (2020). Blueberry juice antioxidants protect osteogenic activity against oxidative stress and improve long-term activation of the mineralization process in human osteoblast-like saos2 cells: Involvement of sirt1. Antioxidants (Basel, Switzerland), 9(2).

2. Laura, BP et al. (2015). Lasting effects of butyrate and low FM/FO diets on growth performance, blood haematology/biochemistry and molecular growth-related markers in gilthead sea bream (Sparus

aurata). Aquaculture. 454 (2016) 8-18.

3. Ballester-Lozano GF et al. (2015). Comprehensive biometric,biochemical and histopathological assessment of nutrient deficiencies in gilthead sea bream fed semi-purified diets. Br J Nutr. 114(5):713-26. 

BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開(kāi)發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過(guò)50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開(kāi)發(fā)了超過(guò)250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽(yáng)離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。