乳酸脫氫酶（LDH） 是一種氧化還原酶，能夠催化乳酸和丙酮酸之間的相互轉(zhuǎn)化。當(dāng)疾病或損傷影響含有LDH的組織時(shí)，細(xì)胞會(huì)將LDH釋放到血液中，在那里其水平會(huì)高于正常值。因此，LDH通常被用于評(píng)估組織或細(xì)胞損傷的存在。這種非放射性比色LDH實(shí)驗(yàn)基于四氮唑鹽MTT在NADH偶聯(lián)的酶促反應(yīng)中被還原為一種還原形式的MTT，其在565 nm處有最大吸收峰。形成的紫色強(qiáng)度與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品乳酸脫氫酶試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)： 

- 高靈敏度和寬線性范圍。使用3 ?L血清或血漿樣本。檢測(cè)限為2 IU/L，線性范圍可達(dá)200 IU/L。

- 均相且簡(jiǎn)單的操作流程。簡(jiǎn)單的“混合-測(cè)量”操作流程可在30分鐘內(nèi)可靠地定量LDH活性。

- 穩(wěn)定且適用于高通量篩選（HTS）。所有試劑均與高通量液體處理儀器兼容。

應(yīng)用： 

- 直接檢測(cè)：血清、血漿及其他來(lái)源中的LDH活性。

- LDH生產(chǎn)中的特性分析與質(zhì)量控制。

- 藥物發(fā)現(xiàn)：篩選和評(píng)估LDH調(diào)節(jié)劑。

試劑盒內(nèi)容（96孔板100次測(cè)試）： 

- 底物緩沖液：20 mL

- 二氫硫色素：120 ?L

- NAD溶液：1 mL

- 校準(zhǔn)液：1.5 mL

- MTT溶液：1.5 mL

儲(chǔ)存條件： 試劑盒在常溫下運(yùn)輸。收到后將所有組分儲(chǔ)存于-20°C。保質(zhì)期：收到后6個(gè)月。

注意事項(xiàng)： 試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)注意事項(xiàng)。請(qǐng)參考材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

實(shí)驗(yàn)步驟： 

本實(shí)驗(yàn)基于動(dòng)力學(xué)反應(yīng)。為確保孵育時(shí)間一致，向樣本中加入工作試劑時(shí)應(yīng)迅速且混合應(yīng)簡(jiǎn)短但充分。建議使用多通道移液器。實(shí)驗(yàn)可在室溫（25°C）或37°C下進(jìn)行。

樣本準(zhǔn)備： 

- 血清和血漿可直接用于實(shí)驗(yàn)。

- 組織：解剖前，用磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）沖洗組織以去除血液。每克組織在含有100 mM磷酸鉀（pH 7.0）和2 mM EDTA的5 mL緩沖液中勻漿。在4°C下以10,000 x g離心15分鐘。取上清液用于實(shí)驗(yàn)。

- 細(xì)胞裂解液：通過(guò)在4°C下以2,000 x g離心5分鐘收集細(xì)胞。對(duì)于貼壁細(xì)胞，不要使用蛋白酶收獲細(xì)胞，而是使用橡膠刮刀。在適當(dāng)體積的冷緩沖液（含有100 mM磷酸鉀，pH 7.0和2 mM EDTA）中勻漿或超聲處理細(xì)胞。在4°C下以10,000 x g離心15分鐘。取上清液用于實(shí)驗(yàn)。

- 所有樣本可在-20到-80°C下儲(chǔ)存至少一個(gè)月。

試劑準(zhǔn)備： 將試劑平衡至所需的反應(yīng)溫度（例如25°C或37°C）。使用前短暫離心試劑管。

通過(guò)混合以下試劑為所有樣本孔準(zhǔn)備足夠的工作試劑（WR）：對(duì)于每個(gè)孔，加入14 ?L MTT溶液、8 ?L NAD溶液、1 ?L二氫硫色素和175 ?L底物緩沖液。建議現(xiàn)配現(xiàn)用。

示例：

使用96孔板協(xié)議對(duì)樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。人類血清的LDH活性為41 IU/L，大鼠血清為220 IU/L，胎牛血清為88 IU/L。

在96孔板實(shí)驗(yàn)中，隨著血清濃度的增加，LDH反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)。

文獻(xiàn)參考：

1. Gabel, M et al (2020). Annexin A2 Egress during Calcium-Regulated Exocytosis in Neuroendocrine Cells. Cells, 9(9), E2059.

2. Sharabi, K. et al (2017). Selective chemical inhibition of PGC-1alpha gluconeogenic activity ameliorates type 2 diabetes. Cell, 169(1), 148-160.

3. Demers, M., et al. (2011). Increased efficacy of breast cancer chemotherapy in thrombocytopenic mice. Cancer Res 71(5):1540-9. 

BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過(guò)50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開發(fā)了超過(guò)250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽(yáng)離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。