研究細(xì)胞增殖和細(xì)胞活性需要準(zhǔn)確量化細(xì)胞培養(yǎng)中活細(xì)胞的數(shù)量。因此，用于計算細(xì)胞活性的實(shí)驗(yàn)對于優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)條件、評估細(xì)胞生長因子和營養(yǎng)物質(zhì)、發(fā)現(xiàn)新型抗生素和抗癌藥物、評估環(huán)境污染物的毒性效應(yīng)以及細(xì)胞介導(dǎo)的毒性以及研究程序性細(xì)胞死亡（凋亡）是必要的。

CellQuanti-MTT 實(shí)驗(yàn)試劑盒提供了一種便捷、靈敏、定量且可靠的實(shí)驗(yàn)方法，用于確定特定培養(yǎng)物中活細(xì)胞的數(shù)量。這種均相比色實(shí)驗(yàn)基于四氮唑鹽MTT（一種淡黃色底物）被還原為甲臜（一種紫色染料）。這種細(xì)胞還原反應(yīng)涉及吡啶核苷酸輔因子NADH/NADPH，并且僅由活細(xì)胞催化。甲臜產(chǎn)物在水中的溶解度較低，以紫色晶體形式存在。用溶解緩沖液溶解生成的甲臜可以方便地定量產(chǎn)物的形成。在550 - 620 nm處測量的產(chǎn)物顏色強(qiáng)度與培養(yǎng)物中活細(xì)胞的數(shù)量成正比。試劑盒中的試劑經(jīng)過精心配制和優(yōu)化，以提高靈敏度、實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)健性和自動化程度。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品CellQuanti MTT 細(xì)胞活力檢測試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)： 

- 安全。非放射性實(shí)驗(yàn)。

- 靈敏且準(zhǔn)確。低至950個細(xì)胞可以被準(zhǔn)確定量。

- 便捷且高通量。“混合-孵育-測量”型實(shí)驗(yàn)。無需洗滌和試劑轉(zhuǎn)移步驟。觀察到的Z'因子為0.5及以上。可以輕松與高通量篩選（HTS）液體處理系統(tǒng)自動化配合使用。

應(yīng)用： 

- 細(xì)胞增殖：細(xì)胞因子、生長因子、營養(yǎng)物質(zhì)的影響。

- 細(xì)胞毒性與凋亡：評估毒性化合物、抗癌抗體、毒素、環(huán)境污染物等。

- 藥物發(fā)現(xiàn)：毒性藥物和抗癌藥物的高通量篩選。

試劑盒內(nèi)容： 

- 試劑：10 mL

- 溶解液：50 mL

- 對照試劑（產(chǎn)品編號# CTTX-050）：50 mg皂甙（單獨(dú)出售）。

儲存條件： 試劑盒在室溫下運(yùn)輸。將試劑儲存于-20°C。溶解液可在室溫下保存。保質(zhì)期：收到后12個月。

注意事項(xiàng)： 試劑僅供研究使用。使用試劑時應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)注意事項(xiàng)。請參考材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

實(shí)驗(yàn)步驟： 

1. 在透明底部的96孔組織培養(yǎng)板中鋪板并培養(yǎng)細(xì)胞（每孔80 ?L）。實(shí)驗(yàn)可以在貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞上進(jìn)行。每孔的細(xì)胞數(shù)量可以在1,000到80,000之間。體積可以在50到150 ?L之間，盡管在此示例中使用的是80 ?L。除了測試樣本外，還必須包括不含細(xì)胞的培養(yǎng)基對照孔或用毒性試劑（如0.1%皂甙）處理的細(xì)胞對照孔。

2. 加入測試化合物和對照，并孵育細(xì)胞所需的時間（通常為過夜）。建議實(shí)驗(yàn)重復(fù)進(jìn)行兩次或三次。建議測試化合物和對照的體積為20 ?L，使用磷酸鹽緩沖液（PBS）或培養(yǎng)基。對照試劑可以方便地用5 mL PBS（1%皂甙）復(fù)溶。

3. 將試劑恢復(fù)至室溫。每孔加入15 ?L（每80 ?L細(xì)胞培養(yǎng)）試劑，并在37°C下孵育4小時。根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)的體積調(diào)整試劑的體積。

4. 每孔加入100 ?L溶解液。在室溫下用軌道振蕩器輕輕混合1小時。根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)的體積調(diào)整溶解液的體積。如果溶解液中出現(xiàn)沉淀，可將瓶子放入溫水浴中或置于37°C，并搖晃以溶解沉淀。

5. 在吸光度平板讀數(shù)器上測量每個孔的570 nm吸光度。甲臜染料的最大吸收波長在560到590 nm之間。如果需要，可以在第二天進(jìn)行吸光度測量。在這種情況下，建議密封平板以減少蒸發(fā)。

示例：

文獻(xiàn)參考：

1. Zhang, Y et al (2009). Estrogen inhibits glucocorticoid action via protein phosphatase 5 (PP5)-mediated glucocorticoid receptor dephosphorylation. J Biol Chem.284 (36):24542-52. Assay: Cell Viability in Human MCF-7 cells.

2. Oxelmark, E et al (2006). The cochaperone p23 differentially regulates estrogen receptor target genes and promotes tumor cell adhesion and invasion. Mol Cell Biol. 26(14):5205-13. Assay: Cell Viability in Human cell lines.

3. Gupta, V et al (2009). Fabrication and characterization of silk fibroinderived curcumin nanoparticles for cancer therapy. Int. J. Nanomedicine2009:4 115–122. Assay: Cell Viability in Human cells.

4. Cheng, H et al (2010). Transient receptor potential melastatin type 7 channel is critical for the survival of bone marrow derived mesenchymal stem cells. Stem Cells Dev. 19(9):1393-403. Assay: Cell Viability in Mouse mesenchymal stem cells.

5. Chen, TS et al (2010). Delineating biological pathways unique to embryonic stem cell-derived insulin-producing cell lines from their noninsulin-producing progenitor cell lines. Endocrinology 151(8):3600-10. Assay: Cell Viability in Mouse stem cells.

6. Desplats, PA et al (2008). Functional roles for the striatal-enriched transcription factor, Bcl11b, in the control of striatal gene expression and transcriptional dysregulation in Huntington’s disease. Neurobiol Dis.31(3):298-308. Assay: Cell Viability in Human cells. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。