葡萄糖脫氫酶（GDH）屬于氧化還原酶家族，特別是那些作用于供體的CH-OH基團(tuán)與其他受體的酶。GDH參與磷酸戊糖途徑。BioAssay Systems的非放射性、比色法GDH檢測(cè)基于在NADH偶聯(lián)的酶促反應(yīng)中四氮唑鹽MTT的還原，生成的MTT還原形式在565 nm處有最大吸收峰。在565 nm處的吸光度增加與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品葡萄糖脫氫酶測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)：

- 快速且靈敏。線性檢測(cè)范圍（20 uL樣本）：15分鐘反應(yīng)時(shí)間為0.5 - 200 U/L。

- 方便且高通量。均相“混合-孵育-測(cè)量”型檢測(cè)。可在高通量篩選液體處理系統(tǒng)上輕松自動(dòng)化，每天處理數(shù)千個(gè)樣本。

應(yīng)用：

- 生物樣本（如血漿、血清、組織和培養(yǎng)基）中GDH活性的測(cè)定。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測(cè)）：

- 檢測(cè)緩沖液：10 mL

- 二氫葉酸還原酶：120 uL

- NAD/MTT：1 mL

- 校準(zhǔn)液：1.5 mL

- 底物：1 mL

儲(chǔ)存條件：  

試劑盒在常溫下運(yùn)輸。收到后將所有組分儲(chǔ)存于-20°C。有效期：收到后6個(gè)月。

注意事項(xiàng)：  

試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)注意事項(xiàng)。請(qǐng)參考材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

操作步驟：

該檢測(cè)基于動(dòng)力學(xué)反應(yīng)。為確保孵育時(shí)間一致，加入工作試劑到樣本中的操作應(yīng)迅速，混合應(yīng)簡(jiǎn)短但充分。建議使用多通道移液器。可在任何所需溫度（例如25°C或37°C）下進(jìn)行檢測(cè)。

樣本準(zhǔn)備：

- 血清和血漿可以直接檢測(cè)。

- 組織：在解剖前，用磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）沖洗組織以去除血液。將組織（50 mg）在含有50 mM磷酸鉀（pH 7.5）的緩沖液中勻漿。在4°C下以10,000 × g離心15分鐘。取上清液用于檢測(cè)。

- 細(xì)胞裂解液：通過(guò)在4°C下以2,000 × g離心5分鐘收集細(xì)胞。對(duì)于貼壁細(xì)胞，不要使用蛋白酶酶收獲細(xì)胞，而是使用橡膠刮刀。在含有50 mM磷酸鉀（pH 7.5）的冷緩沖液中適當(dāng)體積內(nèi)勻漿或超聲細(xì)胞。在4°C下以10,000 × g離心15分鐘。取上清液用于檢測(cè)。

- 所有樣本可以在-20至-80°C下儲(chǔ)存至少一個(gè)月。

試劑準(zhǔn)備：  

將試劑平衡至所需的反應(yīng)溫度（例如25°C或37°C）。使用前短暫離心試管。通過(guò)混合以下試劑為每個(gè)96孔檢測(cè)準(zhǔn)備足夠的工作試劑（WR）：8 uL底物，8 uL NAD/MTT溶液，1 uL二氫葉酸還原酶和70 uL檢測(cè)緩沖液。

反應(yīng)準(zhǔn)備：

1. 將100 uL H?O（ODH?O）和100 uL校準(zhǔn)液（ODCAL）溶液分別加入透明平底96孔板的孔中。

2. 將每個(gè)樣本的20 uL分別加入單獨(dú)的孔中，然后向每個(gè)樣本孔中加入80 uL工作試劑（WR）。輕拍板子以混合。

3. 在酶標(biāo)儀上讀取565 nm的吸光度（OD?），15分鐘后再次讀取（OD??）。

所需材料（但未提供）：  

移液裝置及配件（例如多通道移液器）、透明平底96孔板（例如VWR貨號(hào)82050-760）、離心管和酶標(biāo)儀。

示例：

文獻(xiàn)：

1. Bak, TG (1967) "Studies on glucose dehydrogenase of Aspergillus oryzae. II Purification and physical and chemical properties". Biochim. Biophys. Acta. 139: 277–93.

2. Brink, NG, et al. (1953) "Beef liver glucose dehydrogenase. 1.Purification and properties". Acta Chem. Scand. 7: 1081–1089.

3. Thompson RE, Carper WR (1970) "Glucose dehydrogenase from pig liver. I. Isolation and purification". Biochim. Biophys. Acta 198 (3):397–406.

BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開(kāi)發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過(guò)50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開(kāi)發(fā)了超過(guò)250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽(yáng)離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。