β-葡萄糖醛酸苷酶（BG）是一種催化β-葡萄糖醛酸苷鍵水解的酶。在人體中，β-葡萄糖醛酸苷酶催化從糖蛋白和黏多糖（如肝素硫酸鹽）中水解β-D-葡萄糖醛酸。β-葡萄糖醛酸苷酶的活性對(duì)藥物代謝很重要，因?yàn)樗幬锿ǔＥc葡萄糖醛酸結(jié)合，以形成更易溶于水的輸送系統(tǒng)，依賴后續(xù)的β-葡萄糖醛酸苷酶活性來釋放活性藥物。膽紅素的清除也通過葡萄糖醛酸化來實(shí)現(xiàn)。GUSB常被用作報(bào)告基因，通過β-葡萄糖醛酸苷酶活性來追蹤基因表達(dá)。BioAssay Systems的熒光BG檢測(cè)使用一種β-D-葡萄糖醛酸苷底物，該底物在β-葡萄糖醛酸苷酶水解后會(huì)發(fā)出熒光，并在365/450 nm處讀取。

作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品β-葡萄糖醛酸酶測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)：

- 極高靈敏度。該試劑盒的熒光性質(zhì)可在96孔板中僅用10 uL樣本，在30分鐘內(nèi)檢測(cè)到1×10?? U/L至8 U/L的BG活性。

- 通用性強(qiáng)。該檢測(cè)已驗(yàn)證可用于動(dòng)物和大腸桿菌來源的β-葡萄糖醛酸苷酶。

- 高通量。均相“混合-孵育-測(cè)量”型檢測(cè)。可輕松自動(dòng)化，每天檢測(cè)數(shù)千個(gè)樣本。

應(yīng)用：

- 用于定量測(cè)定組織和細(xì)菌樣本中的β-葡萄糖醛酸苷酶活性。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測(cè)）：

- 底物：4 mL

- 標(biāo)準(zhǔn)品：100 uL

- 終止試劑：1.5 mL

儲(chǔ)存條件：  

試劑盒在冰上運(yùn)輸。收到后將所有組分儲(chǔ)存于-20°C。有效期：收到后6個(gè)月。

注意事項(xiàng)：  

試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)注意事項(xiàng)。請(qǐng)參考材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

操作步驟：

該檢測(cè)基于動(dòng)力學(xué)反應(yīng)。為確保孵育時(shí)間一致，加入底物到樣本中的操作應(yīng)迅速，混合應(yīng)簡(jiǎn)短但充分。建議使用多通道移液器。可在室溫或37°C下進(jìn)行檢測(cè)。

樣本準(zhǔn)備：

- 我們建議在樣本準(zhǔn)備中避免使用表面活性劑，如SDS或Triton 100-X。

- 組織：在解剖前，用磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）沖洗組織以去除血液。將組織（50 mg）在約200 uL裂解緩沖液中勻漿。

- 細(xì)胞裂解液：通過在4°C下以2,000 × g離心5分鐘收集細(xì)胞。對(duì)于貼壁細(xì)胞，不要使用蛋白酶酶收獲細(xì)胞，而是使用橡膠刮刀。在適當(dāng)體積的冷裂解緩沖液中勻漿或超聲細(xì)胞。所有樣本可以在-20至-80°C下儲(chǔ)存至少一個(gè)月。

試劑準(zhǔn)備：  

將所有試劑盒試劑平衡至室溫。倒置或輕輕渦旋試管和瓶子，確保試劑混合均勻。

標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：  

將5 uL提供的標(biāo)準(zhǔn)品與995 uL去離子水混合，制備100 uM預(yù)混液。按照下表準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品。

樣本準(zhǔn)備：  

對(duì)于組織裂解液，我們建議在檢測(cè)前用去離子水將樣本稀釋5-10倍。對(duì)于血清樣本，可能需要15倍稀釋。

1. 將10 uL標(biāo)準(zhǔn)品和10 uL樣本分別加入黑色平底96孔板的孔中。

2. 向每個(gè)孔中加入40 uL底物。輕拍板子以混合。在室溫或37°C下孵育30分鐘。

3. 向每個(gè)孔中加入15 uL終止試劑。輕拍板子以混合。孵育15分鐘。

4. 在λex/em = 365/450 nm處讀取熒光。

該檢測(cè)流程可輕松微型化，用于384孔或1536孔板。

所需材料（但未提供）：  

移液裝置及配件（例如多通道移液器）、黑色平底96孔板（例如VWR貨號(hào)89089-582）、離心管和酶標(biāo)儀。

示例：

文獻(xiàn)：

1. Matsushita-Oikawa, H, et al. (2006) Novel carbohydrate-binding activity of bovine liver β-glucuronidase toward lactose/N-acetyllactosamine sequences. Glycobiology, 16(10), 891-901.

2. Marathe, S. V., & McEwen, J. E. (1995). Vectors with the gus reporter gene for identifying and quantitating promoter regions in Saccharomyces cerevisiae. Gene, 154(1), 105-107

BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。