BioAssay Systems 脂肪酶測定試劑盒- 直接測定血清、血漿、唾液、尿液和其他生物樣本中的脂肪酶活性

脂肪酶催化脂類底物甘油骨架上的酯鍵水解。在人體中，胰脂肪酶是負責在消化系統中分解脂肪的關鍵酶，通過將三酰甘油轉化為單酰甘油和游離脂肪酸。人胰脂肪酶及其相關蛋白2是胰腺分泌的主要脂肪酶。在急性胰腺炎中，脂肪酶水平可能在24到48小時內升高5到10倍。脂肪酶活性的增加還與胰管阻塞、胰腺癌、腎臟疾病、唾液腺炎癥、腸梗阻和其他胰腺疾病有關。脂肪酶水平的降低可能表明胰腺中產生脂肪酶的細胞發生了永久性損傷。

簡單、直接且易于自動化的測定脂肪酶活性的方法非常受歡迎。BioAssay Systems的QuantiChrom?脂肪酶測定試劑盒基于改進的二巰基丙醇三丁酸酯（BALB）方法。在此方法中，脂肪酶水解BALB后形成的巰基（SH）與5,5'-二硫代雙（2-硝基苯甲酸）（DTNB）反應，生成黃色產物。在412nm處測量的顏色強度與樣本中的酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品脂肪酶測定試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

應用領域：

- 直接測定血清、血漿、唾液、尿液和其他生物樣本中的脂肪酶活性。

主要特點：

- 靈敏且準確。96孔板測定的線性檢測范圍為40至1600 U/L脂肪酶活性。

- 便捷且高通量。操作過程僅涉及加入單一工作試劑，并在室溫或37°C下于10分鐘和20分鐘讀取吸光度。可自動化處理數千個樣本/天。

試劑盒組成（96孔板100次測試）：

- 測定緩沖液（pH 8.5）：15 mL

- 顯色試劑：530 mg

- BALB試劑：1.0 mL

- 校準液：2.0 mL（相當于735 U/L）

儲存條件：本產品在室溫下運輸。將所有組分儲存于4°C。保質期：收貨后12個月。

注意事項：試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規注意事項。請參閱材料安全數據表以獲取詳細信息。

操作步驟：

樣本準備：脂肪酶抑制劑（EDTA和某些去污劑如Tween-20、NP-40）、巰基乙醇和二硫蘇糖醇會干擾此測定，應在樣本準備中避免使用。如果樣本不能立即測定，可以冷凍保存至少一個月。組織和細胞裂解液可以通過在冷PBS緩沖液中勻漿并離心（例如14,000 rpm離心5分鐘）獲得。

工作試劑準備：將顯色試劑混入測定緩沖液中，搖動小瓶以混合。加入0.8 mL BALB試劑（足夠進行100次測定）。或者對于部分復溶：對于每個反應孔，混合5 mg顯色試劑、140 uL測定緩沖液和8 uL BALB試劑。工作試劑應現配現用，并在1小時內使用完畢。

重要提示：此測定基于動力學反應，加入工作試劑應迅速。建議使用多通道移液器。

1. 將150 uL H?O和150 uL校準液分別加入到96孔透明底板的孔中。將10 uL樣本分別加入到單獨的孔中。向每個樣本孔中加入140 uL工作試劑。輕輕敲擊板以混合反應混合物。注意：如果要在其他溫度（例如37°C）下進行測定，請在加入樣本之前將工作試劑預熱至該溫度。

2. 在10分鐘（OD10min）和20分鐘（OD20min）時用酶標儀讀取412nm處的吸光度。

3. 計算：脂肪酶活性按以下公式計算，

- 其中OD20min和OD10min分別是樣本在20分鐘和10分鐘時的412nm吸光度值。ODCalibrator和ODH2O分別是校準液和水在20分鐘時的412nm吸光度值。“735”是校準液在測定條件下的等效活性（U/L）。

- 注意：如果計算出的活性高于1600 U/L，請用蒸餾水稀釋樣本并重復測定。將結果乘以稀釋倍數（n）。

- 單位定義：在測定條件（pH 8.5）下，每分鐘催化1 umol底物水解的酶量為1個單位。

實例：

使用96孔板協議對樣本進行雙份測定。脂肪酶活性如下：小鼠血清為809 ± 15 U/L，大鼠血漿為959 ± 23 U/L，大鼠血清為665 ± 14 U/L，山羊血清為44 ± 1 U/L，牛血清為80 ± 1 U/L，人血清為75 ± 6 U/L，人血漿樣本為52 ± 2 U/L

文獻：

1. Imanikia, S. et al. (2019). Xbp-1 remodels lipid metabolism to extend longevity. Cell Reports, 28(3), 581-589.e4.

2. Shen, A. et al. (2017). NAD+ augmentation ameliorates acute pancreatitis through regulation of inflammasome signalling.Scientific reports, 7(1), 3006.

3. Gabbi, C., et al. (2008). Pancreatic exocrine insufficiency in LXRbeta-/- mice is associated with a reduction in aquaporin-1 expression. Proc Natl Acad Sci U S A 105(39):15052-7. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。