果膠酶（EC 3.2.1.15）是一種能夠催化果膠水解的酶。果膠是一種主要存在于陸生植物的中膠層和細胞壁中的雜多糖。在果實成熟過程中，包括果膠酶在內(nèi)的酶會分解中膠層，使細胞分離并使果實變軟。果膠酶在食品工業(yè)中被用于液化果肉、澄清果汁和葡萄酒。

BioAssay Systems 的 DPEC-100 試劑盒提供了一種快速便捷的果膠酶活性檢測方法。在此方法中，底物果膠與檢測試劑形成混濁復合物。在 600 nm 處測量的濁度與未水解果膠的量成正比，因此與果膠酶活性成反比。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品果膠酶測定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點：

- 靈敏且準確。在 96 孔板檢測中，果膠酶活性的線性檢測范圍為 9.2-100 U/L。

- 簡單且高通量。簡單便捷的 40 分鐘“添加-混合-測量”型檢測。高通量格式，兼容實驗室液體處理系統(tǒng)。無需加熱。

- 安全。該試劑盒不使用有毒材料。參考已建立的 DNS 方法。

應用：

- 生物樣本中的果膠酶活性測定（例如植物、真菌組織、果汁、細菌）。

試劑盒內(nèi)容（96 孔板 100 次檢測）：

- 果膠：8 mL

- 試劑：15 mL

- 校準液：500 uL

儲存條件：試劑盒在室溫下運輸。收到后將所有組分儲存于 -20°C。保質(zhì)期：收到后 12 個月。

注意事項：樣本應不含果膠，不混濁且無深色。吸收 600 nm 波長的有色樣本可能需要在檢測前稀釋。

操作步驟：

- 為確保相同的孵育時間，添加果膠到樣本中的操作應迅速。建議使用多通道移液器。孵育后添加試劑時也應如此。為準確測定果膠酶活性，檢測應在 25°C 下孵育。

- 樣本準備：固體樣本可在 100 mM 醋酸緩沖液（pH 4.0）中均質(zhì)化。以 14,000 rpm 離心 5 分鐘，取上清液用于檢測。樣本必須澄清且無顆粒。

- 試劑準備：檢測前將所有試劑盒組分平衡至室溫。使用前短暫離心試管。

- 校準液準備：

1. 將 200 uL 的 H?O 轉移至 96 孔板的兩個孔中。向一個孔中加入 20 uL 的 H?O（ODH?O），向另一個孔中加入 20 uL 的校準液（ODcal）。上下移液混合校準液。

- 反應準備：

1. 將每個樣本的 20 uL 轉移至不同的孔中。另外在另一個孔中加入 20 uL 的 H?O 作為空白。向每個樣本孔和空白孔中加入 60 uL 的果膠。輕輕敲擊平板以混合。

2. 在室溫下孵育 30 分鐘。向每個樣本和空白孔中加入 140 uL 的試劑。輕輕敲擊平板以混合。等待 10 分鐘后，在 600 nm 處讀取光密度。

所需材料（但未提供）：

- 移液裝置及配件（例如多通道移液器）、透明平底 96 孔板（例如 VWR 編號 82050-760）、離心管和酶標儀。如果需要離心混濁樣本，則需要離心機。

實例：

酶滴定使用純化的果膠酶（Sigma 編號 P4716）。果膠酶在 100 mM 醋酸緩沖液（pH 4.0）中稀釋，并按照標準協(xié)議進行檢測。

成熟（“黃色”）和綠色香蕉（Musa acuminata）中的果膠酶活性。香蕉果實和果皮被分離后，在 100 mM 醋酸緩沖液（pH 4.0）中均質(zhì)化。上清液中的果膠酶按照標準協(xié)議進行雙份檢測。

文獻：

1. Oumer, O. J., & Abate, D. (2018). Screening and Molecular Identification of Pectinase Producing Microbes from Coffee Pulp.Biomed Res Int. 2018: 2961767.

 2. Bhadrecha, P., Bala, M., Khasa, Y. P., Arshi, A., Singh, J., & Kumar, M.(2020). Hippophae rhamnoides L. rhizobacteria exhibit diversified cellulase and pectinase activities. Physiology and molecular biology of plants, 26(5),1075-1085.

3. Jiang, X., Lu, Y., & Liu, S. Q. (2020). Effects of pectinase treatment on the physicochemical and oenological properties of red dragon fruit wine fermented with Torulaspora delbrueckii. Lwt 132, 109929. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術生物技術公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學研究的檢測試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

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