植酸酶催化肌醇-(1,2,3,4,5,6)-六磷酸（植酸或IP?）的磷酸酯鍵水解，從而釋放肌醇和磷酸。植酸是植物中磷酸的主要儲存形式。植酸酶在小麥和大麥等谷物中含量豐富，單胃動物對植酸的水解是動物營養(yǎng)的一個關鍵方面。此外，單胃動物缺乏植酸酶可能導致未消化的植酸使過多的磷滲入環(huán)境。

能夠簡單、直接且適合自動化的植酸酶活性檢測程序是非常理想的。BioAssay Systems 的 QuantiChrom? 植酸酶檢測試劑盒基于我們的孔雀石綠磷酸鹽檢測法（POMG-25H）。在 620 nm 處測量的吸光度與植酸釋放的磷酸量成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品胃蛋白酶抑制劑測定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點：

- 簡單：無需混合復雜的檢測試劑。

- 高靈敏度和寬檢測范圍：在 96 孔板檢測中，植酸酶的檢測范圍為 0.01 至 20 U/L。

- 快速便捷：均相“混合-測量”檢測法可在 60 分鐘內(nèi)定量植酸酶活性。

應用：

- 在農(nóng)業(yè)和生物樣本中直接檢測植酸酶活性。

試劑盒內(nèi)容（96 孔板 100 次檢測）：

- 檢測緩沖液（pH 5.5）：10 mL

- POMG 試劑 A：2.5 mL

- 植酸：120 uL

- POMG 試劑 B：120 uL

- 標準品：120 uL（1 mM 磷酸）

儲存條件：試劑盒在室溫下運輸。收到后將所有組分儲存于 4°C。保質(zhì)期：收到后 12 個月。

注意事項：試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規(guī)注意事項。請參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細信息。

操作步驟：

- 樣本準備：在制備植酸酶提取物時，必須避免使用含有磷酸鹽的洗滌劑和緩沖液，因為該檢測對游離磷酸鹽極為敏感。如果樣本中含有磷酸鹽，建議使用 10kDa NMWL 膜濾器（例如 Amicon? Ultra 0.5 mL Ultracel 或類似產(chǎn)品）至少沖洗 3 次以去除磷酸鹽。

- 工作試劑準備：每個孔需要 75 uL 植酸工作試劑（WR）。通過將每孔的 1 uL 植酸原液與 80 uL 檢測緩沖液混合來制備足夠量的 WR。

- 顯色試劑準備：每個孔需要 20 uL 顯色試劑。通過將 100 體積的 POMG 試劑 A 與 1 體積的 POMG 試劑 B 混合來制備足夠量的顯色試劑（例如 1 mL 試劑 A 和 10 uL 試劑 B）。工作試劑在室溫下至少穩(wěn)定 1 天。

重要事項：

1. 所有試劑在使用前必須平衡至室溫。

2. 在每次檢測前，重要的是要檢查所有酶制劑和檢測緩沖液中是否含有游離磷酸鹽。可以通過將 20 uL 顯色試劑加入 80 uL 樣本溶液中來方便地進行檢查。30 分鐘時的空白吸光度（620 nm）應低于 0.2。如果吸光度高于 0.2，則需檢查水中的磷酸鹽水平。

3. 在磷酸鹽（>100 uM）、蛋白質(zhì)和金屬的高濃度下可能會發(fā)生沉淀。如果發(fā)生沉淀，則在 H?O 中對樣本進行系列稀釋，運行檢測，并根據(jù)沒有沉淀的孔選擇稀釋倍數(shù)。使用適當稀釋的樣本重復檢測。

4. 對于活性未知的酶樣本，建議在檢測緩沖液中進行系列稀釋，以使活性處于檢測范圍內(nèi)。高濃度的蛋白質(zhì)可能會通過沉淀干擾顯色反應。

實例：

小麥植酸酶活性的時間過程（室溫）：按照協(xié)議描述進行反應，每個時間點分別進行雙份反應。

小麥植酸酶活性的稀釋系列（室溫）：繪制了 30 分鐘初始速率與酶樣本（ug/孔）的關系圖。

文獻：

1. Dionisio, G., et al (2011) Cloning and Characterization of Purple Acid Phosphatase Phytases from Wheat, Barley, Maize, and Rice. Plant Physiol. 156:1087.

2. Madsen, C. K. and Brinch-Pedersen, H. (2019) Molecular Advances on Phytases in Barley and Wheat. Int. J. Mol. Sci. 20:2459

3. Nakano, T., et al (1999) Purification and Characterization of Phytase from Bran of Triticum aestivum L. cv. Nourin #61. Food Sci. Technol.Res. 5(1): 18

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術生物技術公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學研究的檢測試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。