纖溶酶（3.4.21.7）是一種絲氨酸蛋白酶，在纖溶過程中起著關鍵作用。纖溶酶以無活性形式——纖溶酶原的形式釋放到循環(huán)中，纖溶酶原可以通過尿激酶等酶激活。纖溶酶/纖溶酶原系統(tǒng)在炎癥、細胞外基質降解和傷口愈合中的作用已被廣泛研究。BioAssay Systems 的 DPLM-100 試劑盒提供了一種便捷的比色法來測量纖溶酶活性。在此檢測中，纖溶酶水解一種合成底物以釋放對硝基苯胺（pNA），其在 405 nm 處有吸收。在 405 nm 處吸光度的增加與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品纖溶酶測定試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點：

- 安全且靈敏：非放射性檢測。可使用低至 10 uL 的樣本。96 孔板的線性檢測范圍為 0.35 至 56.5 U/L 活性。

- 快速便捷：操作過程僅涉及加入單一工作試劑并孵育 30 分鐘。

- 高通量：均相“混合-孵育-測量”型檢測。可輕松自動化，每天檢測數(shù)千個樣本。

應用：

- 用于定量測定生物樣本中的纖溶酶活性。

試劑盒內容（96 孔板 100 次檢測）：

- 檢測緩沖液：10 mL

- 底物：200 uL

- pNA 標準品：50 uL（100 mM 標準品）

儲存條件：試劑盒在室溫下運輸。收到后將所有組分儲存于 -20°C。保質期：收到后 6 個月。

注意事項：試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規(guī)注意事項。請參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細信息。

操作步驟：

- 該檢測可在室溫或 37°C 下進行。在檢測前，將檢測緩沖液平衡至所需溫度。使用前短暫離心試管。該檢測基于動力學反應。為確保相同的孵育時間，向樣本中添加工作試劑的操作應迅速，混合應簡短但充分。建議使用多通道移液器。

- 樣本準備：

- 注意：該檢測不測量纖溶酶原。要使用此檢測測量纖溶酶原，樣本必須先與纖溶酶原激活劑（如尿激酶或鏈激酶）孵育。試劑盒中未提供激活劑。

- 血清可以直接用于檢測。

- 標準品準備：通過將 6 uL 100 mM pNA 標準品與 194 uL 檢測緩沖液混合，制備 3000 uM 標準品預混液。根據(jù)下表準備所有標準品。

- 反應準備：

1. 將每個樣本的 10 uL 轉移至不同的孔中。

2. 通過混合，為每個樣本孔制備足夠量的工作試劑（WR），每個孔加入 2 uL 底物和 95 uL 檢測緩沖液。建議現(xiàn)配現(xiàn)用工作試劑。將 WR 保持在 37°C，直到加入樣本孔中。

3. 向每個標準品孔（標準品 #1–4）中加入 90 uL 檢測緩沖液。向每個樣本孔中加入 90 uL WR。輕輕敲擊平板以混合。

4. 立即在酶標儀上讀取 405 nm 處的吸光度（OD?）。在 37°C 下避光孵育 30 分鐘，然后再次讀取 405 nm 處的吸光度（OD??）。或者，在第 3 步之后，在 37°C 下記錄 405 nm 處的動力學曲線，至少持續(xù) 30 分鐘。

- 所需材料（但未提供）：

- 移液裝置及配件（例如多通道移液器）、透明平底 96 孔板（例如 VWR 編號 82050-760）、離心管和酶標儀。

實例：

- 左側：纖溶酶樣本在 37°C 下的 96 孔板中進行檢測。

- 右側：人血清樣本中的纖溶酶原在 37°C 下孵育 30 分鐘后，通過鏈激酶激活。

文獻：

1. Baker, S. K., & Strickland, S. (2020). A critical role for plasminogen in inflammation. The Journal of experimental medicine, 217(4), e20191865.

2. Politis, I., Zavizion, B., Barbano, D. M., & Gorewit, R. C. (1993).Enzymatic Assay for the Combined Determination of Plasmin Plus Plasminogen in Milk: Revisited. Journal of Dairy Science, 76(5), 1260–1267.

3. Korycha-Dahl, M., Dumas, B., Chêne, N., & Martal, J. (1983). Plasmin activity in milk. Journal of Dairy Science, 66(4), 704–711.

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術生物技術公司，專注于研發(fā)、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。