輔酶A（CoA）參與了許多重要的生物活動(dòng)，包括脂肪酸的合成與氧化、檸檬酸循環(huán)中的丙酮酸氧化等。輔酶A最重要的作用之一是攜帶和轉(zhuǎn)移酰基。BioAssaySystems的方法提供了一種簡(jiǎn)單、兩步法且高通量的輔酶A檢測(cè)方法。在該檢測(cè)中，第一步通過(guò)酶反應(yīng)將輔酶A轉(zhuǎn)化為酰基輔酶A，第二步將酰基輔酶A氧化生成反烯酰基輔酶A和H?O?。生成的H?O?與一種特異性染料反應(yīng)，形成粉紅色產(chǎn)物。在570nm處的吸光度或熒光強(qiáng)度（530/585nm）與樣本中的輔酶A濃度成正比。

作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品【干冰】EnzyChrom 輔酶A檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)

-靈敏。使用10uL樣本。線性檢測(cè)范圍：比色法檢測(cè)為5到1000uM輔酶A，熒光法檢測(cè)為3到100uM輔酶A。

-便捷。常溫“混合即讀”操作可輕松自動(dòng)化，每天可處理數(shù)千個(gè)樣本。

應(yīng)用

-檢測(cè)：多種生物樣本中的輔酶A。

試劑盒組成

-檢測(cè)緩沖液：20mL

-染料試劑：120uL

-酶A：干燥

-酶B：120uL

-底物：600uL

-標(biāo)準(zhǔn)品：50uL

-ATP：120uL

儲(chǔ)存條件：試劑盒在運(yùn)輸過(guò)程中使用冰袋冷藏。收到后，請(qǐng)將所有組分儲(chǔ)存于-20°C。有效期：自收到之日起六個(gè)月。

注意事項(xiàng)：試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)，請(qǐng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)操作注意事項(xiàng)。詳細(xì)信息請(qǐng)參考材料安全數(shù)據(jù)表。

操作步驟

試劑準(zhǔn)備

-通過(guò)向酶A管中加入120uL去離子水來(lái)復(fù)溶酶A。通過(guò)上下移液確保酶A完全溶解，并在室溫下孵育15分鐘。將復(fù)溶后的酶A儲(chǔ)存于-20°C，并在2個(gè)月內(nèi)使用。

比色法檢測(cè)

-液體樣本（如血清和血漿）可直接檢測(cè)。牛奶和固體樣本可在水中加入5%異丙醇和5%TritonX-100后勻漿，隨后通過(guò)0.45umPTFE針頭濾器（例如VWRCat#28145-493）過(guò)濾。

-注意：含有巰基的試劑（例如β-巰基乙醇、二硫蘇糖醇，>5uM）、疊氮化鈉、EDTA和十二烷基硫酸鈉已知會(huì)干擾此檢測(cè)，應(yīng)在樣本準(zhǔn)備中避免使用。

-1.將所有組分平衡至室溫。打開前短暫離心試劑管。檢測(cè)過(guò)程中將解凍的試劑管置于冰上。

-重要提示：解凍后的標(biāo)準(zhǔn)品溶液應(yīng)為澄清且無(wú)色。如果底物溶液渾濁，請(qǐng)將其置于37°C并輕輕旋轉(zhuǎn)試管（不要渦旋），直到溶液澄清。

-2.標(biāo)準(zhǔn)品：通過(guò)將5uL100mM標(biāo)準(zhǔn)品用495uL檢測(cè)緩沖液稀釋，制備1000uM的標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液。

以下物質(zhì)會(huì)干擾檢測(cè)，應(yīng)在樣本準(zhǔn)備中避免使用：抗壞血酸、SDS（>0.2%）、疊氮化鈉、NP-40（>1%）和Tween-20（>1%）。

文獻(xiàn)參考：

1. Veloso D, Veech RL. (1975). Enzymatic determination of long-chain fatty acyl-CoA. Methods Enzymol. 35:273-278.

2. Okabe H, et al. (1980). Enzymic determination of free fatty acids in serum. Clin Chem. 26:1540-1543.

3. Matsubara C, et al. (1983). A spectrophotometric method for the determination of free fatty acid in serum using acyl-coenzyme A

synthetase and acyl-coenzyme A oxidase. Anal Biochem. 130:128-133. 

BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過(guò)50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開發(fā)了超過(guò)250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽(yáng)離子檢測(cè)。

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