膠原蛋白是結(jié)締組織的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)蛋白，也是哺乳動物體內(nèi)最豐富的蛋白質(zhì)。它有許多不同種類和形式，其中I型到V型最為常見。除了在體內(nèi)發(fā)揮的關(guān)鍵作用外，它還有許多醫(yī)學(xué)應(yīng)用，例如在重建手術(shù)（包括骨骼和皮膚移植）中的使用。由于其抗衰老和皮膚修復(fù)特性，它還被廣泛用于化妝品。目前用于定量檢測膠原蛋白的檢測方法從需要使用酸和堿進(jìn)行廣泛水解處理到使用昂貴的抗體和復(fù)雜的協(xié)議不等。

BioAssaySystems的膠原蛋白檢測試劑盒提供了一種非常簡單、安全且靈敏的方法來定量檢測樣本中的膠原蛋白。在此程序的第一步中，樣本中的膠原蛋白被酶消化成肽段。隨后，含有N端甘氨酸的肽段與染料試劑反應(yīng)形成熒光復(fù)合物。該產(chǎn)物的熒光強度在λex/em=375/465nm處測量，與樣本中的膠原蛋白濃度成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品【干冰】EnzyFluo 膠原蛋白檢測試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點

-安全。非放射性檢測。

-靈敏且準(zhǔn)確。使用20uL樣本。96孔板檢測的線性檢測范圍為2ug/mL到50ug/mL膠原蛋白。

-便捷且高通量。“加樣-混合-讀取”型檢測。無需洗滌和試劑轉(zhuǎn)移步驟。可輕松自動化，每天可處理數(shù)千個樣本。

應(yīng)用

-直接檢測：生物樣本和化妝品中的膠原蛋白。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測）

-染料試劑：5mL

-膠原蛋白標(biāo)準(zhǔn)品：40uL（3mg/mL）

-緩沖液：5mL

-顯色劑：1mL

-消化酶：70uL

儲存條件：試劑盒在運輸過程中使用冰袋冷藏。收到后，請將試劑盒組分儲存于-20°C。有效期：自收到之日起6個月。

注意事項：試劑僅供研究使用。打開前短暫離心試劑管。檢測前將所有組分恢復(fù)至室溫。使用試劑時，請遵循實驗室試劑的常規(guī)操作注意事項。詳細(xì)信息請參考材料安全數(shù)據(jù)表。

操作步驟：

樣本準(zhǔn)備：此檢測針對低水平膠原蛋白的檢測進(jìn)行了優(yōu)化。由于檢測的靈敏度和膠原蛋白的豐富性，通常需要較大的稀釋倍數(shù)才能將樣本置于本試劑盒的線性檢測范圍內(nèi)。強烈建議進(jìn)行系列稀釋以確定某種樣本的最佳稀釋倍數(shù)。生物液體樣本（如血清、細(xì)胞裂解液、組織裂解液）首先離心以去除任何顆粒。可能需要進(jìn)行系列稀釋以確定每種樣本在此檢測中的最佳稀釋倍數(shù)。

左圖：96孔板檢測中的標(biāo)準(zhǔn)曲線

右圖：有（+）和無（-）消化酶的膠原蛋白樣本。

A）30ug/mL膠原蛋白標(biāo)準(zhǔn)品。

B）EssentialWholesaleMarineCollagen，稀釋250倍。

C）大鼠血清，稀釋20倍（2.7mg/mL蛋白質(zhì)）。

D）牛血清，稀釋10倍（7.0mg/mL蛋白質(zhì)）。

E）人血清，稀釋20倍（3.14mg/mL蛋白質(zhì)）。

文獻(xiàn)參考：

1. Inoue, Y., et al (2012). Accelerating effect of soy peptides containing collagen peptides on type I and III collagen levels in rat skin. Biosci Biotechnol Biochem 76(8): 1549-51.

2. Kinoshita, J., et al (2010). Type IV collagen levels are elevated in the serum of patients with peritoneal dissemination of gastric cancer.Oncol Lett 1(6): 989-994.

3. Seo, H.Y., et al. (2014). Phospholipase D1 decreases type I collagen levels in hepatic stellate cells via induction of autophagy. Biocehm Biophys Res Commun 449(1): 38-43.

4. Di Lulio, G.A., et al (2002). Mapping the ligand-binding sites and disease associated mutations on the most abdundant protein in the human, type I collagen. J Biol Chem 277 (6): 4223-4231. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

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