草酰乙酸（OAA）是三羧酸循環(huán)中的一個中間體，并且參與糖異生。草酰乙酸可以通過蘋果酸的氧化、天冬氨酸的脫酰胺作用，或者通過二氧化碳與丙酮酸或磷酸烯醇式丙酮酸的縮合反應形成。BioAssay Systems的草酰乙酸檢測試劑盒提供了一種簡單、直接且適合自動化的程序，用于測量草酰乙酸的濃度。草酰乙酸被轉化為丙酮酸，隨后丙酮酸被氧化，同時染料被轉化為有色且具有熒光的形式。氧化后的染料在570納米處的吸光度或在激發(fā)/發(fā)射波長為530/585納米處的熒光強度與樣品中草酰乙酸的濃度成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品EnzyChrom 草酰乙酸測定試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點

靈敏且準確。比色法檢測的線性范圍為7至400微摩爾/升草酰乙酸，熒光法檢測的線性范圍為1至40微摩爾/升草酰乙酸。

應用

直接檢測：血漿、血清、組織和培養(yǎng)基中的草酰乙酸。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測）

顯色劑：10毫升

ODC酶：120微升

染料試劑：120微升

草酰乙酸標準品：干粉

儲存條件

試劑盒在運輸過程中使用冰塊包裝。收到后，所有試劑盒組分應儲存在-20℃。保質期為收到后六個月。

注意事項

試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規(guī)預防措施。請參閱材料安全數據表以獲取詳細信息。

操作步驟

樣品制備

組織或細胞樣品（2×10⁶）可以在100微升PBS中勻漿。

以14,000轉/分鐘的速度離心5分鐘。然后使用10千道爾頓的離心濾器（例如Amicon Ultra-0.5）對上清液進行脫蛋白處理。

如果檢測血清或血漿，樣品必須脫蛋白，并且應使用內標。

如果計劃測量培養(yǎng)基中的草酰乙酸，如果可能的話，盡量避免使用含有高濃度丙酮酸的培養(yǎng)基（例如DMEM、L-15、F12等）。

文獻參考：

1. Laplante, A et al. (1995) Assay of Blood and Tissue Oxaloacetate and α-Ketoglutarate by Isotope Dilution Gas Chromatography-Mass Spectrometry. Anal. Biochem. 224: 580-7.

2. Parvin, R et al (1980). Convenient rapid determination of picomole amounts of oxaloacetate and oxaloacetate. Anal. Biochem.104: 296-9.

3. Eschenbrenner E, Guynn RW (1976). Measurement of oxaloacetate in tissue extracts by enzymatic cycling. Anal Biochem. 72:220-9.

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術生物技術公司，專注于研發(fā)、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發(fā)現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

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