蛋白質(zhì)磷酸化在調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)活性方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。已知大量的蛋白激酶和磷酸酶參與多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。在生命科學(xué)研究和藥物發(fā)現(xiàn)中，能夠監(jiān)測(cè)這些信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、目標(biāo)蛋白磷酸化狀態(tài)以及藥物效應(yīng)的快速檢測(cè)方法是非常理想的。

含有Src同源區(qū)2結(jié)構(gòu)域的磷酸酶-2（SHP2，或SHPTP2、PTPN11、PTP2C）是一種廣泛表達(dá)的蛋白酪氨酸磷酸酶，在有絲分裂激活、代謝控制、轉(zhuǎn)錄調(diào)控和細(xì)胞遷移中發(fā)揮著調(diào)控作用。BioAssay Systems的SHP2（Y542）磷酸化ELISA試劑盒提供了一種快速、靈敏的檢測(cè)方法，用于測(cè)量人細(xì)胞中的磷酸化蛋白pSHP2（Y542），并將磷酸化水平與同一孔中的總蛋白含量進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。這種簡(jiǎn)單高效的檢測(cè)方法無(wú)需細(xì)胞裂解液制備，可用于研究潛在的信號(hào)通路以及抑制劑、siRNA或激活劑對(duì)通路的影響。在該檢測(cè)中，96孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞經(jīng)過(guò)固定和通透處理。使用特異性一抗檢測(cè)SHP2（Y542）的磷酸化，隨后使用辣根過(guò)氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的二抗和熒光底物，以及一種測(cè)量同一孔中總蛋白的熒光試劑。

作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷(xiāo)產(chǎn)品EnzyFluo 人SHP2(Y542)磷酸化酶聯(lián)免疫吸附試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)

新型且改進(jìn)。總檢測(cè)時(shí)間從標(biāo)準(zhǔn)的21小時(shí)縮短至6.5小時(shí)（手工操作時(shí)間2.5小時(shí)）。

簡(jiǎn)單便捷。細(xì)胞直接在96孔板中培養(yǎng)，無(wú)需細(xì)胞裂解。

準(zhǔn)確且高通量。在同一孔中將蛋白磷酸化水平與細(xì)胞總蛋白進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，極大地減少了孔間差異。可以輕松自動(dòng)化為高通量96孔板檢測(cè)方法，每天可檢測(cè)數(shù)千個(gè)樣本。

應(yīng)用

檢測(cè)完整細(xì)胞中SHP2（Y542）的磷酸化狀態(tài)。

評(píng)估激活劑、抑制劑、siRNA等對(duì)通路的調(diào)節(jié)作用。

已測(cè)試物種：人（未測(cè)試其他物種）。

試劑盒組成

洗滌緩沖液原液：25毫升

封閉緩沖液：25毫升

蛋白染色液：6毫升

染料試劑：120微升

Ab1：10微升

Ab2（gM-HRP）：10微升

儲(chǔ)存條件

試劑盒在冰上運(yùn)輸。收到后，將所有試劑儲(chǔ)存于-20攝氏度。這些試劑的保質(zhì)期約為收到后6個(gè)月。

注意事項(xiàng)

試劑僅用于研究。使用這些試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)預(yù)防措施。請(qǐng)參考材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

NIH 3T3細(xì)胞中SHP2（Y542）磷酸化的誘導(dǎo)

將3×10⁴個(gè)NIH 3T3細(xì)胞接種于100微升培養(yǎng)基中，放入96孔板。在37攝氏度下過(guò)夜培養(yǎng)后，用50納克/毫升的PDGFbb在無(wú)血清培養(yǎng)基中處理細(xì)胞。使用ESHP2-100試劑盒檢測(cè)SHP2（Y542）的磷酸化。

文獻(xiàn)參考：

1. Cohen, P. (2002). The origins of protein phosphorylation. Nature Cell Biology. 4 (5): E127–130.

2. Smoly, I. et al (2017). An asymmetrically balanced organization of kinases versus phosphatases across Eukaryotes determines their distinct impacts". PLOS Computational Biology. 13 (1): e1005221.

3. Vlastaridis, P. et al (2017). Estimating the total number of phosphoproteins and phosphorylation sites in eukaryotic proteomes.GigaScience. 6 (2): 1–11 

BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專(zhuān)注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類(lèi)齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開(kāi)發(fā)，以滿(mǎn)足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過(guò)50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開(kāi)發(fā)了超過(guò)250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽(yáng)離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶(hù)提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。