蛋白質(zhì)被稱為“生命的基石”，是生命科學(xué)中最重要的大分子之一。蛋白質(zhì)是由氨基酸組成的多肽，在生物學(xué)的各個(gè)方面發(fā)揮著各種關(guān)鍵作用。蛋白質(zhì)定量是生命科學(xué)家們非常常見的操作。對(duì)于生命科學(xué)家來說，簡單、直接且可自動(dòng)化的蛋白質(zhì)濃度測(cè)量程序是非常理想的。BioAssay Systems 的 QuantiChrom? 蛋白質(zhì)檢測(cè)試劑盒是基于改良的考馬斯亮藍(lán) G 法。這種染料會(huì)與蛋白質(zhì)特異性地形成藍(lán)色復(fù)合物，其在 595 nm 處測(cè)量的顏色強(qiáng)度與樣本中的蛋白質(zhì)濃度成正比。經(jīng)過優(yōu)化的配方顯著減少了原始樣本中物質(zhì)的干擾，并且對(duì)肽類的靈敏度有所提高。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品蛋白質(zhì)測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

應(yīng)用：

直接檢測(cè)：總蛋白質(zhì)濃度。

主要特點(diǎn)：

- 靈敏且準(zhǔn)確：使用 10 ?L 樣本。在 96 孔板檢測(cè)中，檢測(cè)范圍為 0.06 - 1.0 mg/mL 蛋白質(zhì)。

- 簡單且高通量：“混合即讀”程序涉及添加單一工作試劑并測(cè)量吸光度。可以輕松自動(dòng)化為 96 孔板的高通量檢測(cè)，每天可處理數(shù)千個(gè)樣本。

- 低干擾：葡萄糖、Tris、維生素、氨基酸、DNA、RNA、鹽類、EDTA（< 12 mM）、苯酚（< 50 mM）、尿素（< 0.6 M）、Triton（< 0.1%）和 SDS（< 0.1%）不會(huì)對(duì)檢測(cè)產(chǎn)生干擾。

- 多功能性：檢測(cè)可以在 96 孔板或比色皿中進(jìn)行。

試劑盒內(nèi)容（96 孔板進(jìn)行 500 次檢測(cè)）：

- 試劑：20 mL 5 倍濃縮液

- 蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品：1 mL 1.0 mg/mL 牛血清白蛋白（BSA）

儲(chǔ)存條件： 該試劑盒在室溫下運(yùn)輸。將試劑儲(chǔ)存于 4°C，標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)存于 -20°C。保質(zhì)期：自收到之日起 12 個(gè)月。

注意事項(xiàng)： 試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)預(yù)防措施。詳細(xì)信息請(qǐng)參閱材料安全數(shù)據(jù)表。

試劑準(zhǔn)備：

- 通過將 1 體積的 5 倍濃縮試劑加入 5 體積的蒸餾水中，準(zhǔn)備足夠量的工作試劑。在使用前將試劑恢復(fù)至室溫。

使用 96 孔板的操作流程：

1. 按照表格所示稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。將 10 ?L 稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品和稀釋后的樣本雙份移入透明底部 96 孔板的孔中。將稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)存于 -20°C 以備后用。

2. 加入 200 ?L 工作試劑，輕輕敲擊板子使其混合均勻。

3. 在 570 - 630 nm（峰值 595 nm）處測(cè)量吸光度。

使用比色皿的操作流程：

1. 按照 96 孔板檢測(cè)的步驟準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品。將 50 ?L 稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品和 50 ?L 樣品移入比色皿中。

2. 加入 1000 ?L 工作試劑，輕輕敲擊比色皿使其混合均勻。

3. 在 570 - 630 nm（峰值 595 nm）處測(cè)量吸光度。

計(jì)算：

- 從標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度值中減去空白（水，#8）的吸光度值，并將吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)品濃度作圖。使用標(biāo)準(zhǔn)曲線來確定樣本中的蛋白質(zhì)濃度。

使用 96 孔板的操作流程：

- 移液裝置及其配件。

- 空白 96 孔板（例如康寧 Costar 品牌）。

- 96 孔板讀取器。

使用比色皿的操作流程：

- 比色皿和分光光度計(jì)。

一般注意事項(xiàng)：

- 如果蛋白質(zhì)濃度 > 1 mg/mL，則需用蒸餾水稀釋樣本，并使用校準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)的吸光度值來計(jì)算樣本中的蛋白質(zhì)濃度。一旦試劑與樣本混合，即可進(jìn)行讀取。通過將 50 ?L 樣本加入 200 ?L 試劑中，可以實(shí)現(xiàn)高靈敏度檢測(cè)（檢測(cè)范圍 3 - 200 ?g/mL）。

示例：

- 上圖：標(biāo)準(zhǔn)操作流程。

- 下圖：50 ?L 樣本加上 200 ?L 試劑。

文獻(xiàn)：

1. Sharifuzzaman SM, et al (2011). Subcellular components of probiotics Kocuria SM1 and Rhodococcus SM2 induce protective immunity in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum)against Vibrio anguillarum. Fish Shellfish Immunol. 30(1):347-53.

2. Cucchiarini M et al (2011). Metabolic activities and chondrogenic differentiation of human mesenchymal stem cells following recombinant adeno-associated virus-mediated gene transfer and overexpression of fibroblast growth factor 2. Tissue Eng Part A. 17(15-16):1921-33.

3. Olsen AS et al (2010). Limb regeneration is impaired in an adult zebrafish model of diabetes mellitus. Wound Repair Regen.18(5):532-42. Assay: Protein in rat tissue. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。