通過(guò)使用雙報(bào)告基因系統(tǒng)可以提高報(bào)告基因檢測(cè)的準(zhǔn)確性。 

其中一個(gè)報(bào)告基因與感興趣的啟動(dòng)子相關(guān)聯(lián)，用于評(píng)估特定實(shí)驗(yàn)條件的影響，而第二個(gè)報(bào)告基因用作對(duì)照，提供基線反應(yīng)。SuperLight?雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)法允許在單個(gè)樣品中順序測(cè)量?jī)煞N不同熒光素酶（螢火蟲熒光素酶[FFL]和海腎熒光素酶[RL]）的活性。首先通過(guò)加入FFL試劑來(lái)測(cè)量螢火蟲熒光素酶的發(fā)光。接下來(lái)，向同一孔中加入RL試劑。RL試劑同時(shí)猝滅螢火蟲熒光素酶的發(fā)光，并啟動(dòng)海腎熒光素酶反應(yīng)。兩種反應(yīng)產(chǎn)生的光都可以方便地用發(fā)光儀進(jìn)行測(cè)量。

作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品雙熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn) 

- 高靈敏度和寬檢測(cè)范圍：能夠檢測(cè)低至2飛克（fg）的熒光素酶。  

- 與常規(guī)實(shí)驗(yàn)室和高通量篩選（HTS）格式兼容：檢測(cè)可在試管或微孔板中進(jìn)行，并可使用任何發(fā)光儀進(jìn)行測(cè)量。可在HTS液體處理系統(tǒng)上輕松自動(dòng)化。  

- 快速便捷：三步檢測(cè)法可在20分鐘內(nèi)完成雙熒光素酶水平的檢測(cè)。

應(yīng)用 

- 基因調(diào)控：基因表達(dá)水平、啟動(dòng)子活性的特征、受體、轉(zhuǎn)錄因子和小分子對(duì)基因表達(dá)的調(diào)節(jié)。  

- 藥物發(fā)現(xiàn)：用于基因調(diào)節(jié)劑的高通量篩選。

試劑盒內(nèi)容（96孔板100次檢測(cè)） 

- 裂解緩沖液：25毫升  

- FFL試劑：25毫克  

- 檢測(cè)緩沖液：25毫升  

- RL試劑：400毫克  

可根據(jù)要求提供定制的大量試劑。

儲(chǔ)存條件 

試劑盒在常溫下運(yùn)輸。收到后將所有試劑儲(chǔ)存于-20°C。保質(zhì)期：收到后12個(gè)月。  

注意事項(xiàng)：試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)注意事項(xiàng)。請(qǐng)參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

操作步驟 

- 試劑準(zhǔn)備：建議在檢測(cè)緩沖液中新鮮配制FFL和RL試劑。計(jì)算每次檢測(cè)所需的每種試劑的用量（96孔板每孔100微升，384孔板每孔25微升），并稱取足夠的每種試劑（FFL試劑2毫克/毫升，RL試劑35毫克/毫升）。輕輕搖晃每種配制好的試劑，直至完全溶解（約10分鐘）。配制好的FFL試劑在-20°C下儲(chǔ)存時(shí)可穩(wěn)定保存長(zhǎng)達(dá)4周；然而，不建議長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存配制好的RL試劑，理想情況下應(yīng)在4小時(shí)內(nèi)使用。

數(shù)據(jù)分析 

發(fā)光強(qiáng)度（RLU）與熒光素酶濃度成正比。對(duì)于每個(gè)單獨(dú)的樣品，實(shí)驗(yàn)報(bào)告基因的RLU應(yīng)通過(guò)對(duì)照?qǐng)?bào)告基因的RLU進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。  

上圖：熒光素酶滴定實(shí)驗(yàn)，熒光素酶在細(xì)胞裂解液中稀釋，并在96孔板中進(jìn)行檢測(cè)。  

左圖：在HEK293細(xì)胞中滴定螢火蟲熒光素酶質(zhì)粒，以0.2微克的海腎熒光素酶質(zhì)粒作為對(duì)照。在海腎熒光素酶檢測(cè)過(guò)程中，99.97%的螢火蟲熒光素酶發(fā)光被猝滅。

文獻(xiàn)參考：

1. Paguio A, et al. (2010). Improved dual-luciferase reporter assays for nuclear receptors. Curr Chem Genomics. 4: 43-9.

2. Rakauskaite R, et al. (2011). A rapid, inexpensive yeast-based dualfluorescence assay of programmed--1 ribosomal frameshifting for high-throughput screening. Nucleic Acids Res. 39(14): e97.

3. Jia S, et al. (2011). Relative quantification of protein-protein interactions using a dual luciferase reporter pull-down assay system.PLoS One. 6(10): e26414

BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過(guò)50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開發(fā)了超過(guò)250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽(yáng)離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。