ADP/ATP比率的變化已被用于區(qū)分細(xì)胞死亡和存活的模式。ATP水平的增加和ADP水平的降低標(biāo)志著細(xì)胞處于增殖狀態(tài)。相反，ATP水平的降低和ADP水平的增加則代表細(xì)胞處于凋亡或壞死狀態(tài)，其中在壞死中ATP的降低和ADP的增加比凋亡更為顯著。

BioAssay Systems 的 EnzyLight? ADP/ATP比率檢測(cè)試劑盒提供了一種快速的方法，用于測(cè)量ADP和ATP水平，以篩選哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的凋亡、壞死和細(xì)胞增殖。該檢測(cè)分為兩個(gè)步驟。在第一步中，工作試劑裂解細(xì)胞以釋放ATP和ADP。在熒光素酶存在的情況下，ATP立即與底物D-熒光素反應(yīng)產(chǎn)生光。光的強(qiáng)度是細(xì)胞內(nèi)ATP濃度的直接指標(biāo)。

在第二步中，通過酶促反應(yīng)將ADP轉(zhuǎn)化為ATP。這種新形成的ATP隨后與D-熒光素反應(yīng)，如同第一步中一樣。

這種非放射性、均質(zhì)的基于細(xì)胞的檢測(cè)是在微孔板中進(jìn)行的。該試劑與所有培養(yǎng)基兼容，并且適用于96孔和384孔板的高通量篩選應(yīng)用中的所有液體處理系統(tǒng)。

作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品EnzyLight ADP/ATP比值測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)

安全：非放射性檢測(cè)。

均質(zhì)且便捷：“混合 孵育 測(cè)量”型檢測(cè)。無需洗滌和試劑轉(zhuǎn)移步驟。

穩(wěn)定且適合高通量篩選（HTS）：在96孔和384孔板中，通常可觀察到大于0.5的Z'因子。可在高通量篩選液體處理系統(tǒng)上輕松自動(dòng)化操作，每天可處理數(shù)千個(gè)樣本。

應(yīng)用

細(xì)胞凋亡和壞死的檢測(cè)。

細(xì)胞增殖：細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的影響。

藥物發(fā)現(xiàn)：抗腫瘤藥物的高通量篩選。

結(jié)果解讀

不同比率的解讀可能會(huì)因細(xì)胞類型和使用條件而顯著不同。然而，以下可以作為指導(dǎo)：

1. 測(cè)試顯示與對(duì)照細(xì)胞相比，ATP水平顯著升高，而ADP水平?jīng)]有顯著增加 = 增殖。

2. 測(cè)試顯示與對(duì)照細(xì)胞相比，ATP水平降低，ADP水平增加 = 凋亡。

3. 測(cè)試顯示與對(duì)照細(xì)胞相比，ATP水平顯著降低，ADP水平大幅增加 = 壞死。

文獻(xiàn)參考：

1. Rajamani, U., Gross, A. R., Ocampo, C., Andres, A. M., Gottlieb, R.A., & Sareen, D. (2017). Endocrine disruptors induce perturbations in endoplasmic reticulum and mitochondria of human pluripotent stem cell derivatives. Nature communications, 8(1), 219.

2. Villa-Bellosta, R., Hamczyk, M. R., & Andres, V. (2017). Novel phosphate-activated macrophages prevent ectopic calcification by increasing extracellular ATP and pyrophosphate. PloS one, 12(3),e0174998

3. Taneike, M., Nishida, K., Omiya, S., Zarrinpashneh, E., Misaka, T.,Kitazume-Taneike, R. & Shah, A. M. (2016). mTOR hyperactivation by ablation of tuberous sclerosis complex 2 in the mouse heart induces cardiac dysfunction with the increased number of small mitochondria mediated through the down-regulation of autophagy.PLoS One, 11(3), e0152628. 

BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。