蛋白質(zhì)磷酸化在調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)活性方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。許多蛋白激酶和磷酸酶已知參與多種信號(hào)傳導(dǎo)通路。在生命科學(xué)研究和藥物發(fā)現(xiàn)中，能夠監(jiān)測此類信號(hào)傳導(dǎo)通路、靶蛋白磷酸化狀態(tài)以及藥物效應(yīng)的快速檢測方法是極為理想的。

肝激酶B1（LKB1，STK11，PJS，hLKB1）是絲氨酸/蘇氨酸激酶家族的成員，它調(diào)節(jié)細(xì)胞極性并作為腫瘤抑制因子發(fā)揮作用。BioAssay Systems 的 LKB1(S431)磷酸化ELISA試劑盒提供了一種快速且靈敏的方法，用于測量培養(yǎng)細(xì)胞中磷酸化蛋白pLKB1(S431)的水平，并將磷酸化水平與同一孔中的總蛋白含量進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。這種簡單高效的檢測方法省去了細(xì)胞裂解液的制備步驟，可用于研究潛在的信號(hào)通路以及抑制劑、siRNA或激活劑對(duì)通路的影響。在此檢測中，生長在96孔板中的細(xì)胞被固定和通透化。通過使用特異性一抗檢測LKB1(S431)的磷酸化，隨后使用辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的二抗和熒光底物，以及用于測量同一孔中總蛋白的熒光試劑。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品EnzyFluo 人/小鼠LKB1(S431)磷酸化ELISA試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)

改進(jìn)型：總檢測時(shí)間從標(biāo)準(zhǔn)的21小時(shí)縮短至6.5小時(shí)（實(shí)際操作時(shí)間2.5小時(shí)）。

簡單便捷：細(xì)胞直接在96孔板中培養(yǎng)，無需細(xì)胞裂解。

準(zhǔn)確且高通量：將蛋白質(zhì)磷酸化水平與同一孔中的總細(xì)胞蛋白進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，極大地減少了孔間差異。可作為高通量96孔板檢測自動(dòng)化操作，每天可處理數(shù)千個(gè)樣本。

應(yīng)用

全細(xì)胞中LKB1(S431)磷酸化狀態(tài)的測定。

通過激活劑、抑制劑、siRNA等評(píng)估通路調(diào)節(jié)效果。

已測試物種：人、小鼠、大鼠。

試劑盒組成

儲(chǔ)備洗滌緩沖液：25 mL

封閉緩沖液：25 mL

蛋白染色液：6 mL

染料試劑：120 uL

Ab1：10 uL

Ab2（gM-HRP）：10 uL

儲(chǔ)存條件

本試劑盒在運(yùn)輸過程中使用冰袋包裝。收到后，請(qǐng)將所有試劑存放在-20℃。這些試劑的有效期約為收到后6個(gè)月。

注意事項(xiàng)

試劑僅供研究使用。使用這些試劑時(shí)需遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)安全措施。請(qǐng)參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

NIH 3T3細(xì)胞中LKB1(S431)磷酸化的誘導(dǎo)

將3×10?個(gè)NIH 3T3細(xì)胞在100 ?L培養(yǎng)基中接種到96孔板中。經(jīng)過37℃過夜孵育后，細(xì)胞用50 ng/mL的PDGFbb在無血清培養(yǎng)基中處理。使用ELKB1-100試劑盒檢測LKB1(S431)的磷酸化。

結(jié)果示例：

文獻(xiàn)參考：

1. Cohen, P. (2002). The origins of protein phosphorylation. Nature Cell Biology. 4 (5): E127–130.

2. Smoly, I. et al (2017). An asymmetrically balanced organization of kinases versus phosphatases across Eukaryotes determines their distinct impacts". PLOS Computational Biology. 13 (1): e1005221.

3. Vlastaridis, P. et al (2017). Estimating the total number of phosphoproteins and phosphorylation sites in eukaryotic proteomes.GigaScience. 6 (2): 1–11 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。