二胺氧化酶（DAO），也被稱為組胺酶或含銅的胺氧化酶，是一種參與動(dòng)物體內(nèi)組胺代謝、氧化和失活的酶。其最高水平出現(xiàn)在消化道和胎盤(pán)中。組胺攝入量與組胺降解能力之間的不平衡可能導(dǎo)致組胺不耐受（HIT）。檢測(cè)血清中的DAO活性對(duì)于診斷HIT是有用的。

BioAssay Systems的非放射性、熒光法DAO檢測(cè)試劑盒基于腐胺氧化生成吡咯啉以及NH3和H2O2的過(guò)程。生成的H2O2隨后被辣根過(guò)氧化物酶（HRP）用于氧化一種染料，使其產(chǎn)生熒光。在λex/em = 530/585 nm處的熒光增加與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems熱銷產(chǎn)品二胺氧化酶測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)

- 快速且靈敏。使用10 L樣本。在25?C下反應(yīng)30分鐘時(shí)，線性檢測(cè)范圍為0.5到6 U/L。

- 方便。操作過(guò)程僅涉及加入單一工作試劑，并在0分鐘和30分鐘時(shí)讀取熒光。室溫檢測(cè)，無(wú)需37°C加熱設(shè)備。

- 高通量。可輕松自動(dòng)化為高通量96孔板檢測(cè)，每天可處理數(shù)千個(gè)樣本。

應(yīng)用領(lǐng)域

- 直接檢測(cè)：血清或血漿樣本中的DAO活性。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測(cè)）

- 檢測(cè)緩沖液：10 mL

- HRP酶：120 L

- 底物：120 L

- H2O2標(biāo)準(zhǔn)品：100 L

- 染料試劑：120 L

儲(chǔ)存條件

- 試劑盒在常溫下運(yùn)輸。收到后將所有組分儲(chǔ)存于-20°C。有效期：收到后6個(gè)月。

- 注意事項(xiàng)：試劑僅供研究使用。打開(kāi)前需短暫離心管子。檢測(cè)前將所有組分恢復(fù)至室溫。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)注意事項(xiàng)。請(qǐng)參考材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

操作步驟（使用96孔板）

1. 內(nèi)標(biāo)制備。首先，將5 L H2O2標(biāo)準(zhǔn)品（882 mM）與495 L去離子水混合，制備500 L 8.82 mM H2O2溶液。然后，將20 L 8.82 mM H2O2與960 L去離子水混合，制備180 M內(nèi)標(biāo)溶液。稀釋后的H2O2需在1小時(shí)內(nèi)使用。

2. 工作試劑（WR）制備。為所有樣本孔制備足夠的工作試劑，每孔混合：85 L檢測(cè)緩沖液、1 L HRP酶、1 L底物和1 L染料試劑。為所有樣本空白和內(nèi)標(biāo)孔制備足夠的空白工作試劑（BWR），每孔混合：85 L檢測(cè)緩沖液、1 L HRP酶和1 L染料試劑（即不加底物）。

3. 樣本加樣。將每個(gè)樣本的10 L分別加入黑色平底96孔板的三個(gè)獨(dú)立孔中：一個(gè)用于樣本測(cè)量（FS），一個(gè)用于樣本空白（FSB），一個(gè)用于內(nèi)標(biāo)（FIS）。向樣本和樣本空白孔中加入10 L去離子水。向內(nèi)標(biāo)孔中加入10 L 180 M H2O2。

4. 試劑加樣。向每個(gè)樣本孔中加入80 L WR。向每個(gè)樣本空白和內(nèi)標(biāo)孔中加入80 L BWR。

5. 熒光讀取。在時(shí)間0和30分鐘時(shí)，讀取λex/em = 530/585 nm處的熒光。

所需材料（但未提供）

- 移液裝置、離心管、黑色平底96孔板（例如Greiner貨號(hào)655209）和酶標(biāo)儀。

示例：

人血清中DAO的滴定

文獻(xiàn)參考：

1. Music, E., et al (2013). Serum diamine oxidase activity as a diagnostic test for histamine intolerance. Wien Klin Wochenschr 125:239-243.

2. Mondovi B, et al (2013). Effects of amine oxidases in allergic and histamine-mediated conditions. Recent Pat Inflamm Allergy Drug Discov. 7(1):20-34.

3. Maintz L, Novak N. (2007). Histamine and histamine intolerance. Am J Clin Nutr. 85(5):1185-96. 

BioAssay Systems是一家位于美國(guó)北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開(kāi)發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長(zhǎng)的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過(guò)50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開(kāi)發(fā)了超過(guò)250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽(yáng)離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國(guó)區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國(guó)客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。