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加入 1/10 體積的乙酸鈉（3 mol?L，PH=5.2）于 DNA 溶液中充分混勻，使其最終濃度為 0.3 mol?L

此方法適用于小量質(zhì)粒DNA 的提取提取的質(zhì)粒 DNA 可直接用于酶切PCR擴(kuò)增 。

瓊脂糖電泳，將特異電泳帶用刀切下放入到 EP 管中，稱瓊脂糖帶的重量；2. 按照每100mg 加 400?l 的量加入binding buffer，放入到 EP管振蕩器中，45℃～55℃溫育振蕩，直到所有的瓊脂糖都

1.用蒸餾水將制膠模具和梳子沖洗干凈，放在制膠平板上，封閉模具邊緣，架
好梳子；

PCR 反應(yīng)管中調(diào)制反應(yīng)液

實(shí)驗(yàn)室常用 DNA 聚合酶有三種： TaKaRa TaqTM，TaKaRa EXTaqTM 和Pyrobest TMDNA Polymerase。TaKaRa TaqTM 是一般的 DNA 聚合酶，保真性較差 ，但價(jià)錢便宜，一般用于基因表達(dá)的檢測(cè)等。TaKaRa EXTaqTM是具有 Proof reading活性的耐熱性 DNA 聚合酶，具有一定的保真性，而且其擴(kuò)增得到的 PCR 產(chǎn)物 3’端附有一個(gè) “A”堿基，如果希望直接將產(chǎn)物克隆 到 T-vector 可以用此酶。Pyrobest TM DNA

介紹組蛋白印跡的操作詳細(xì)流程。

不同類型抗體儲(chǔ)存時(shí)注意要避免污染或損失請(qǐng)每次均查看抗體說明書是否有特殊的保存要求。Abcam 公司對(duì)于非正確保存的抗體不保證其有效。對(duì)于保存適當(dāng)?shù)目贵w，大多數(shù)的活性保持時(shí)間為數(shù)個(gè)月甚至數(shù)年。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，流式細(xì)胞術(shù)，免疫沉淀(IP)，緩沖液配制方法見免疫印跡（western blot）部分，染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP)

8% 多聚甲醛溶液配制時(shí)應(yīng)60°C 加熱攪拌（溫度不要超過60°C）。溶液達(dá)到60°C 時(shí)多聚甲醛溶解，加入500ml 0.2mM 磷酸鹽緩沖液，使0.1mM 磷酸鹽緩沖液中含4% 多聚甲醛。小心滴加1 當(dāng)量的氫氧化鈉溶液直至溶液澄清（每500ml 滴加1 至2 滴；如果仍未澄清，可繼續(xù)滴加。或者，可在1 至2L 溶液中加入2 粒固體氫氧化鈉）。溶液變冷后過濾。

三乙醇胺-吐溫緩沖液（含0.1% 的吐溫20）
配制1L 溶液：取100ml 10 倍三乙醇胺緩沖液加890ml 超純水，再加入10ml 吐溫20 (10%)吐溫20 很粘稠會(huì)粘在量取的槍頭上，要確定加入三乙醇胺緩沖液的變性劑體積足夠。建議使用10% 的溶液進(jìn)行配制，會(huì)比用未稀釋的吐溫20 溶液容易配制。

無特異性抗體對(duì)照時(shí)出現(xiàn)背景過高與蛋白A 或G 非特異性結(jié)合應(yīng)采用預(yù)清除處理，即在加入抗體前，將裂解的樣本與磁珠混合1小時(shí)然后分離使用。